Cell Total RNA ipinya Apo Total RNA ipinya ìwẹnu awọn ohun elo lati cell
Apejuwe Apo:
RNA ti a sọ di mimọ pupọ ati didara ga ni a le gba lati oriṣiriṣi awọn sẹẹli ti o gbin ni iṣẹju 11.
RNase-ọfẹ
Ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ℃)
Pẹlu DNA-Cleaning Column
Ipese RNA giga
Yara: Pari isediwon ni iṣẹju 11
Aabo: Ko si kemikali Organic
Apejuwe
Ohun elo yii nlo ọwọn alayipo ati agbekalẹ ti o dagbasoke nipasẹ Foregene, eyiti o le yọkuro daradara-mimọ giga ati didara lapapọ RNA lati awọn sẹẹli ti o gbin ni 96, 24, 12, ati awọn awo-daradara 6.
Ohun elo naa n pese Ọwọn Itọpa DNA ti o munadoko, eyiti o le ni rọọrun ya supernatant ati lysate sẹẹli, di ati yọ DNA genomic kuro.Iṣẹ naa rọrun ati fifipamọ akoko.
To RNA-nikan Ọwọn le daradara dè RNA pẹlu kan oto agbekalẹ.A o tobi nọmba ti awọn ayẹwo le wa ni ilọsiwaju ni nigbakannaa.
Awọn paati ohun elo
| Akopọ Kit | RE-03111 | RE-03114 |
| 50 T | 200 T | |
| Ifipamọ cRL1* | 25 milimita | 100 milimita |
| Ifipamọ cRL2 | 15 milimita | 60 milimita |
| Ifipamọ RW1* | 25 milimita | 100 milimita |
| Ifipamọ RW2 | 24 milimita | 96 milimita |
| RNase-Ọfẹ ddH2O | 10 milimita | 40 milimita |
| RNA-Nikan iwe | 50 | 200 |
| Ọwọn Isọmọ DNA | 50 | 200 |
| Ilana | 1 | 1 |
* Jọwọ wọ awọn ibọwọ ki o ṣe awọn igbese aabo lakoko iṣẹ naa bi Buffer cRL1 ati Buffer RW1 ni awọn iyọ rudurudu ibinu ninu.
Awọn ẹya & awọn anfani
■ Gbogbo ilana ni a ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ℃), laisi iwẹ yinyin ati iwọn otutu kekere.
■ Gbogbo ohun elo naa jẹ Ọfẹ RNase, ko si ye lati ṣe aniyan nipa ibajẹ RNA.
■ Ẹwọn DNA-Cleaning ni pato so DNA di pataki, kit naa le yọ ibajẹ DNA jinomiki laisi afikun afikun DNase.
∎ Imujade RNA ti o ga: Iwe RNA-nikan ati agbekalẹ alailẹgbẹ le sọ RNA di mimọ daradara.
■ Iyara iyara: rọrun lati ṣiṣẹ ati pe o le pari ni iṣẹju 11.
■ Aabo: Ko si ohun elo reagenti ti a nilo.
■ Didara to gaju: RNA ti a sọ di mimọ jẹ mimọ to gaju, laisi amuaradagba ati awọn idoti miiran, ati pe o le pade ọpọlọpọ awọn adanwo ti o tẹle.
Ohun elo Kit
O dara fun isediwon ati ìwẹnumọ ti lapapọ RNA lati awọn sẹẹli ti o gbin ni 96, 24, 12, ati 6-daradara farahan.
Sisan iṣẹ
Aworan atọka
Aworan atọka batiri jeli agarose ti Cell Total RNA Isolation Kit ṣe itọju awọn nọmba oriṣiriṣi ti awọn sẹẹli ti o wa loke, elution iwọn didun 20μl, mu 2μl mimọ lapapọ RNA 1%.
Ibi ipamọ ati igbesi aye selifu
Ohun elo naa le wa ni ipamọ fun awọn oṣu 12 ni iwọn otutu yara (15-25 ℃) tabi 2–8 ℃ fun akoko pipẹ (osu 24).
Buffer cRL1 le wa ni ipamọ ni 4 ℃ fun oṣu 1 lẹhin fifi 2-hydroxy-1-ethanethiol(iyan).
A ko yọ RNA jade tabi awọn ikore RNA kere
Nigbagbogbo ọpọlọpọ awọn ifosiwewe ti o ni ipa ṣiṣe imularada, gẹgẹbi: akoonu RNA ayẹwo ti ara, ọna ṣiṣe, iwọn didun elution, ati bẹbẹ lọ.
1. Ice wẹ tabi cryogenic (4 ° C) centrifugation ti a ṣe nigba isẹ.
Iṣeduro: Ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ° C) jakejado gbogbo ilana, ma ṣe iwẹ yinyin ati centrifuge ni awọn iwọn otutu kekere.
2. Itọju apẹẹrẹ ti ko tọ tabi akoko ipamọ ayẹwo ti o pọju.
Iṣeduro: Tọju awọn ayẹwo ni -80 °C tabi di ninu omi nitrogen ati yago fun lilo didi-diẹ leralera;gbiyanju lati lo àsopọ titun tabi awọn sẹẹli ti o gbin fun isediwon RNA.
3. Ayẹwo lysis ti ko to.
Iṣeduro: Nigbati o ba n ṣe isokan, rii daju pe àsopọ ti wa ni isokan ti o to ati pe awọn sẹẹli tisọ ti pin ni kikun lati ṣe alaye itusilẹ ti RNA.
4. A ko fi eluent kun daradara.
Iṣeduro: Jẹrisi pe RNase-Ọfẹ ddH2O ti wa ni afikun dropwise si arin ti awọn awo iwe iwe ìwẹnumọ.
5. Iwọn ti o pe ti ethanol pipe ko ni afikun si Buffer RL2 tabi Buffer RW2.
Iṣeduro: Tẹle awọn itọnisọna, ṣafikun iwọn didun to pe ti ethanol pipe si Buffer RL2 ati Buffer RW2 ki o dapọ daradara ṣaaju lilo ohun elo naa.
6. Tissue sample doseji ko yẹ.
Iṣeduro: Lo 10-20 mg ti àsopọ tabi (1-5) × 106awọn sẹẹli fun 500 μl saarin RL1, bi lilo àsopọ ti o pọ julọ le ja si idinku RNA ti o dinku.
7. Iwọn didun elution ti ko tọ tabi elution ti ko pari.
Iṣeduro: Iwọn elution ti iwe-mimọ jẹ 50-200 μl;ti ipa elution ko ba ni itẹlọrun, o gba ọ niyanju lati fa akoko gbigbe iwọn otutu yara lẹhin fifi RNase-ọfẹ ddH ti o ti ṣaju tẹlẹ.2O, fun apẹẹrẹ fun awọn iṣẹju 5-10.
8.The ìwẹnumọ iwe ni o ni ethanol aloku lẹhin Buffer RW2 w.
Iṣeduro: Ti iyọkuro ethanol ba wa lẹhin fifọ Buffer RW2, centrifugation tube ofo fun iṣẹju 1, akoko fun iṣẹ centrifugation tube ofo le pọ si iṣẹju 2, tabi iwe iwẹnu le gbe ni iwọn otutu yara fun iṣẹju 5 lati yọ ethanol ti o ku kuro ni deede.
RNA ti a sọ di mimọ ti bajẹ
Didara ti RNA ti a sọ di mimọ jẹ ibatan si awọn nkan bii titọju apẹẹrẹ, ibajẹ RNase, ati ifọwọyi, ati bẹbẹ lọ.
1. Awọn ayẹwo ti ara ko ni pa ni akoko.
Iṣeduro: Ti a ko ba lo awọn ayẹwo ara tabi awọn sẹẹli ni akoko ti o yẹ lẹhin gbigba, lẹsẹkẹsẹ cryopreserve ni -80 °C tabi nitrogen olomi.Lati yọ RNA jade, lo àsopọ tuntun tabi ayẹwo sẹẹli nigbakugba ti o ṣee ṣe.
2. Tun didi-thawing ti awọn ayẹwo àsopọ.
Iṣeduro: Nigbati o ba tọju awọn ayẹwo ti ara, o dara julọ lati ge wọn si awọn ege kekere fun itoju, ki o yọ ọkan ninu awọn ege naa kuro nigba lilo wọn lati yago fun didi didi ti ayẹwo ati ibajẹ ti RNA.
3. RNase ti ṣafihan tabi ko wọ awọn ibọwọ isọnu, awọn iboju iparada, ati bẹbẹ lọ lakoko iṣẹ naa.
Iṣeduro: Awọn adanwo isediwon RNA ni a ṣe dara julọ ni awọn yara ifọwọyi RNA lọtọ ati pe tabili ti sọ di mimọ ṣaaju idanwo naa.
Wọ awọn ibọwọ isọnu ati awọn iboju iparada lakoko idanwo lati dinku ibajẹ RNA ti o fa nipasẹ ifihan RNase.
4. Reagents ti wa ni ti doti pẹlu RNase nigba lilo.
Iṣeduro: Rọpo pẹlu Apo Ipinya Apapọ RNA Ẹranko tuntun fun awọn adanwo ti o jọmọ.
5. Awọn tubes centrifuge, awọn imọran, ati bẹbẹ lọ ti a lo ninu ifọwọyi RNA ti doti pẹlu RNase.
Iṣeduro: Jẹrisi pe awọn tubes centrifuge, awọn imọran, pipettes, ati bẹbẹ lọ ti a lo ninu isediwon RNA jẹ gbogbo RNase-ọfẹ.
RNA ti a sọ di mimọ yoo kan awọn adanwo ibosile
RNA ti sọ di mimọ nipasẹ ọwọn iwẹnumọ, ti awọn ions iyọ, akoonu amuaradagba ti tobi ju yoo ni ipa lori idanwo isalẹ, gẹgẹbi: transcription yiyipada, Northern Blot et al.
1. Awọn elutioned RNA ni iyọ ion iṣẹku.
Iṣeduro: Jẹrisi pe iwọn didun ti ethanol ti o pe ti ni afikun si Buffer RW2 ati ṣe awọn fifọ iwe-mimọ 2 ni iyara centrifugal ti a tọka fun iṣẹ;ti iyọkuro iyọ iyọ eyikeyi ba wa, lọ kuro ni iwe iwẹnumọ si Buffer RW2 fun iṣẹju 5 ni iwọn otutu yara ki o ṣe centrifugation lati mu yiyọkuro idoti iyọ pọ si.
2. Aloku Ethanol ni RNA elutioned.
Iṣeduro: Jẹrisi pe lẹhin fifọ RW2 fifọ, ṣe iṣiṣẹ centrifugation tube ofo ni iyara centrifugation ti a fihan fun iṣẹ, mu akoko iṣẹ centrifugation tube ofo pọ si awọn iṣẹju 2 ti o ba tun wa iyokù ethanol, tabi fi silẹ ni iwọn otutu yara fun 5 m
