Lnc-RT Heroᵀᴹ I (Pẹlu gDNase) (Super Premix fun iṣelọpọ cDNA akọkọ-okun lati lncRNA)
Awọn pato
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT Akoni TM I (Pẹlu gDNase) jẹ eto transcription yiyipada ti o dagbasoke ni pataki fun lncRNA lati yọkuro ibajẹ DNA jinomiki ni kiakia.5× gDNase Mix le yara yọkuro jiini ti o ku ni RNA ni 42°C fun awọn iṣẹju 2, ni imunadoko ni yago fun kikọlu ti jiomedi lori awọn abajade qPCR.
5 × L-RT HeroTM Mix ni Foregene LncRNA Reverse Transcriptase ni pataki ti o dagbasoke nipasẹ Foregene, eyiti o jẹ iru tuntun ti transscriptase yiyipada pataki fun lncRNA ati awọn awoṣe eka RNA gigun miiran, pẹlu ibaramu RNA ti o lagbara ati ṣiṣe gbigbasilẹ ipadasẹhin giga.Eto iṣapeye jẹ ki oṣuwọn iyipada yiya yiyara ati pe o le ni rọọrun ṣe igbasilẹ awọn awoṣe RNA pẹlu akoonu GC ti o ga ati eto ile-ẹkọ keji ti eka.Iṣọkan cDNA okun akọkọ le pari ni 42°C ni iṣẹju 15.
Awọn paati ohun elo
| 5× gDNase Mix |
| 5× L-RT akoni TM Mix |
| RNase-Ọfẹ ddH2O |
| Awọn ilana |
Awọn ẹya & awọn anfani
■Agbara daradara lati yọ gDNA kuro, eyiti o le yọ gDNA kuro ninu awoṣe laarin awọn iṣẹju 2.
■ O le yi iyipada ti lncRNA pada daradara.Nigbati ọja transcription yiyipada ti wa ni abẹ si qPCR, iye Ct dinku ju ti eto ifasilẹyin mora lọ.
∎ Eto iyipada ti o munadoko, o gba to iṣẹju 15 nikan lati pari iṣelọpọ ti cDNA okun akọkọ.
■ Awọn awoṣe eka: awọn awoṣe pẹlu akoonu GC ti o ga ati igbekalẹ elekeji le tun jẹ iyipada pẹlu ṣiṣe giga.
■ Eto iyipada ifamọ giga, awọn awoṣe ipele pg le tun gba cDNA didara ga.
■ Eto transcription yiyipada ni iduroṣinṣin igbona giga, iwọn otutu ifasẹyin ti o dara julọ jẹ 42℃, ati pe o tun ni iṣẹ iyipada ti o dara ni 50℃.
Ohun elo Kit
lncRNA ojulumo pipo onínọmbà.
Ayẹwo pipo pipe lncRNA.
O le ni kiakia ati ni pipe ṣe itupalẹ RNA wa kakiri gẹgẹbi ọlọjẹ RNA.
Iyipada iyipada ti awọn awoṣe RNA pẹlu akoonu GC giga tabi eto ile-ẹkọ keji ti o nipọn.
Sisan iṣẹ
Ibi ipamọ ati igbesi aye Selifu
Ohun elo naa yẹ ki o wa ni ipamọ ni -20°C. Tọju ọja naa sinu firiji otutu igbagbogbo ni -20°C lẹsẹkẹsẹ lẹhin gbigba.Ti awọn ipo ibi ipamọ ba yẹ, ọja naa kii yoo ba iṣẹ eyikeyi jẹ lakoko akoko ifọwọsi ọdun 1.
Isoro Analysis Guide
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-kan pato ampilifaya
1. Unreasonable alakoko oniru
Iṣeduro: Awọn ipilẹṣẹ apẹrẹ ni ibamu si awọn ipilẹ apẹrẹ alakoko.
2. Genom iṣẹku.
Imọran: Rii daju pe igbesẹ akọkọ ti iwọn otutu ifasilẹ yiyọ gDNA jẹ 42°C, ati pe akoko ifasilẹ naa le tun fa si 5min.
Ko si ifihan agbara nipasẹ RT-qPCR
1. RNA ti wa ni degraded.
Iṣeduro: Ohun elo fun isediwon RNA yẹ ki o jẹ tuntun bi o ti ṣee ṣe, ati pe o yẹ ki o lo RNA didara-giga ati mimọ-giga.
2. RNA ni awọn inhibitors.
Iṣeduro: Awọn inhibitors transcription ni gbogbo igba pẹlu SDS, iyọ guanidine, EDTA, bbl A ṣe iṣeduro lati wẹ RNA precipitate pẹlu 70% ethanol lati yọ awọn inhibitors kuro.
3. Awọn oran apẹrẹ akọkọ.
Iṣeduro: Ni ibamu si ilana apẹrẹ alakoko, tun ṣe awọn alakoko fun ayewo.
Ẹgbẹ ibi-afẹde han ni iṣakoso ofo
1. Idoti ti awọn irinṣẹ iṣẹ tabi awọn reagents.
Iṣeduro: Gbogbo awọn reagents tabi ohun elo fun idanwo yẹ ki o jẹ autoclaved.Ṣọra ati jẹjẹ nigbati o ba n mu lati ṣe idiwọ awọn ayẹwo DNA lati fa mu sinu pipette tabi ta jade kuro ninu tube centrifuge.
2. Kontaminesonu waye lakoko igbaradi ti eto ifasilẹ PCR.
Iṣeduro: Ṣe awọn iṣọra to ṣe pataki nigbati o ba mu, gẹgẹbi: wọ awọn ibọwọ latex, lilo awọn imọran àlẹmọ.Lo Adalu PCR Akoko Gidi ni eto ẹri-ibajẹ.
3. Awọn alakoko ti wa ni degraded.
Imọran: Lo SDS-PAGE electrophoresis lati rii boya awọn alakoko ti bajẹ, ki o rọpo pẹlu awọn alakoko tuntun fun awọn adanwo wiwa fluorescence.
Ilana itọnisọna:
Lnc-RT HeroTM I (Pẹlu gDNase) (Super Premix fun iṣelọpọ cDNA akọkọ-okun lati lncRNA) Ilana itọnisọna
