• facebook
  • ti sopọ mọ
  • youtube

Iṣaaju:

RNA, orukọ ijinle sayensi ribonucleic acid, abbreviation rẹ wa lati RiboNucleic Acid, jẹ iru acid nucleic ti a ṣẹda nipasẹ sisopọ o kere ju dosinni ti ribonucleotides nipasẹ awọn iwe phosphodiester.

Ipilẹ ti iṣawari RNA ni lati jade Lapapọ RNA ti ko ni idoti, ati pe ipilẹ ipilẹ ti isediwon RNA le jẹ akopọ ni aijọju bi atẹle:

1. Pa awọn sẹẹli run ni akọkọ

2. Lẹhinna yọ awọn idoti macromolecular kuro (awọn ọlọjẹ, lipids, DNA, ati bẹbẹ lọ)

3. Nikẹhin, RNA ti wa ni iponju lakoko ti o yọ awọn iyọ ati awọn ohun elo Organic kuro, ati mimu RNA siwaju sii.

Ti o ti kọja ati bayi ti isediwon ọna

Ni igba akọkọ ti iran ti RNA isediwon ọna ni TRIzol ojoriro ọna (reagents lo ni guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, ati be be lo) ti a se nipa a grandfather ti a npè ni Piotr Chomczynski ati Mamamama Nicoletta Sacchi, nitori yi kiikan faye gba RNA isediwon Awọn ọna ati ki o rọrun, niwon ki o si bẹrẹ awọn upsurge RNA.

fjghj

Lẹ́yìn náà, Bàbá àgbà ta itọ́sí yìí fún Invitrogen, Invitrogen sì gbé ọ̀nà yìí lárugẹ sí gbogbo ayé, ó sì di ọ̀nà gbígbòòrò.

Nigbamii, Invitrogen ti gba nipasẹ Thermo!

Ọja Aṣoju: Invitrogen's TRIzol reagent

cjgh

Sibẹsibẹ, ọna ojoriro TRIzol nilo ọpọlọpọ ojoriro ati isediwon ti RNA, ati awọn reagents ti a lo jẹ majele ti o gba akoko pipẹ lati ṣiṣẹ.

Nitorinaa, ọna iwẹnumọ-ensaemusi ti iran-keji ti wa, ni lilo membran silica gel bi ohun elo adsorption acid nucleic kan pato lati mu imupadabọ RNA pọ si ninu apẹẹrẹ lakoko yiyọ awọn idoti miiran.

Ọna iran keji jẹ irọrun iṣẹ ṣiṣe lori ipilẹ iṣẹ iduroṣinṣin, dinku ifosiwewe eewu, ati ilọsiwaju ṣiṣe ti isediwon RNA.

Awọn ọja aṣoju: QIAGEN RNeasy ati ọpọlọpọ awọn ọja inu ile

ghjfgh

Bibẹẹkọ, mejeeji awọn ọna iran akọkọ ati keji nilo lilo DNA lati yọ idoti DNA kuro, eyiti o mu aibalẹ kan wa si awọn adanwo isale atẹle.DNase ti o ku yoo dinku ṣiṣe ti transcription yiyipada ati dinku iṣajọpọ cDNA okun-akọkọ, nitorinaa ni ipa lori deede awọn abajade.

Nitorinaa, ọna isediwon iran kẹta jẹ iṣapeye lori ipilẹ iran keji.Idanwo naa ko nilo lati ṣafikun eyikeyi awọn enzymu, ati pe RNA le ni irọrun gba pẹlu awọn ọwọn meji nikan.

Àwọ̀n 1: Àpótí Ìsọmọ́ DNA láti mú DNA kúrò

Ọwọn 2: RNA-nikan Ọwọn pataki adsorbs ati ki o gba RNA pada

Iru iṣẹ ti o rọrun bẹ kii ṣe fifipamọ akoko nikan, ṣugbọn tun ṣe irọrun iṣẹ ti awọn adanwo isalẹ!

Awọn ọja aṣoju: QIAGEN RNeasy Plus atiForegeneRNA ìwẹnumọ jara awọn ọja

cgjfgj

(RNeasy Plus)

vghjgh

(Foregene'sOhun ọgbin Lapapọ Apo Ipinya RNA)

Sọ fun ọ ni idakẹjẹ!Ohun elo RNA ti Foregene tun ṣafihan RNase Eraser ti o rọrun-si-lilo, eyiti o le yọ 400μg ti RNase kuro patapata lori dada ti o lagbara ni iṣẹju 1, laisi ṣafikun eyikeyi awọn nkan majele si ara eniyan!

Aworan1: Ilana lafiwe ilana iṣẹ

cjcghj

Awọn ọja Foregene le pari isediwon RNA ni awọn orin meji nikan, maṣe jẹ ki awọn miiran jowú ti ilọsiwaju idanwo rẹ!

Aworan2:Eesiperimenta afiwe chart

Iran akọkọ (1: TRIzol)

Iran keji (2: RNeasy ti QIAGEN)

Iran kẹta (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

ghjghk

Aworan3: ayaworan qPCR (ayaworan ti ampilifaya)

Iran akọkọ (alawọ ewe tumọ si TRIzol -, pupa tumọ si TRIzol +)

jhkgjhfg

Iran keji (buluu ọrun tumo si QIAGEN RNeasy-, pupa tumo si QIAGEN RNeasy +)

cjh1

Iran kẹta (bulu tumọ si QIAGEN RNeasy pẹlu, alawọ ewe tumọ si Foregene)

fgjgy2

(Akiyesi: qPCR graph “-” tọkasi pe ko ti fikun-un DNA ati koti DNA ko yọkuro. Nitoribẹẹ, CT ga julọ ati pe abajade ko peye; “+” tọkasi pe a ti ṣafikun DNA ati pe a ti yọ ibajẹ DNA kuro, abajade jẹ deede)

Gbogbo igbesoke imọ-ẹrọ tumọ si pe iṣẹ ṣiṣe idanwo naa n dagbasoke ni irọrun ati itọsọna ore-olumulo diẹ sii.

Foregene ṣe ifọkansi lati ṣe iranlọwọ fun awọn oniwadi imọ-jinlẹ diẹ sii ṣafipamọ akoko idanwo ati idiyele, gba awọn abajade esiperimenta didara giga, ati ni apapọ ṣẹda awọn aṣeyọri iwadii imọ-jinlẹ diẹ sii.


Akoko ifiweranṣẹ: Jul-09-2021