Ṣe o tun nlo Trizol lati jade RNA bi?
Gosh, maṣe jẹ ki n ṣe aniyan nipa ilera rẹ!
Trizol ti fẹẹ yasọtọ, ma sọ ​​fun mi pe o tun wa ninu okunkun?

Ẹya akọkọ ti Trizol reagent jẹ phenol, ati awọn reagents Organic gẹgẹbi chloroform ni a tun ṣafikun ni iṣẹ idanwo.Ifihan igba pipẹ yoo fa ipalara si ilera rẹ, paapaa ifarakan ara taara le fa awọn ijona kemikali ti o lagbara ati awọn aleebu ayeraye.

Labẹ awọn ipo deede, awọn alabaṣiṣẹpọ yàrá le dinku awọn eewu nikan nipa jimọra ara wọn ni kikun (wọ aṣọ laabu, awọn ibọwọ ati awọn iboju iparada).

Ati imọran mi si ọ ni: jọwọ rọpo Trizol taara lati yago fun ipalara lati orisun.

1. Ọja iran akọkọ ti isediwon RNA
Wa jade ni 1987 (Trizol reagents)

anfani:
Die pipe isediwon

Awọn alailanfani:
Awọn reagents majele gẹgẹbi guanidine isothiocyanate-phenol-chloroform ni a nilo;
Išišẹ ti o lewu;
Nilo lati lo DNAse lati yọ idoti DNA kuro

2.Awọn keji iran ọja ti RNA isediwon
Wa jade ni 1994 (QIAGEN RNeasy ati ọpọlọpọ awọn ọja inu ile)

anfani:
Ọna centrifugal ọwọn ti gba, eyiti o rọrun lati ṣiṣẹ;

Alailanfani:
Nilo lati centrifuge lati yọ idoti àsopọ kuro
Nilo lati lo DNAse lati yọ idoti DNA kuro

3.Ọja iran kẹta ti isediwon RNA
Ti njade ni ọdun 2005 (QIAGEN RNeasy Plus ati ForegeneAwọn ọja isọdọtun RNA)

anfani:
Lo oju-iwe yiyọ DNA taara lati yọ DNA ati idoti àsopọ ni akoko kanna, fifipamọ akoko ati igbiyanju;
Ailewu ati irọrun, ko si iwulo lati ṣafikun iwe àlẹmọ ati DNA lati ni rọọrun yọ awọn aimọ kuro ki o yago fun idoti DNA

Jẹ ki a wo awọn iyatọ iṣẹ ṣiṣe laarin ọja akọkọ-iran (Trizol), ọja iran-keji (RNeasy) ati ọja iran-kẹta (Foregene) ti isediwon RNA:

Išišẹ ti o wa ninu nọmba naa jẹ kedere: ọja-kẹta ni awọn anfani ti o han gbangba

Awọn ọrọ mẹta nikan lati ṣapejuwe: rọrun!Yara!Aabo

Apẹrẹ PK ti awọn abajade esiperimentafuniran akọkọ, iran-keji ati awọn ọja iran-kẹta ti isediwon RNA:

1. Electrophoretogram

Iran akọkọ (1: Trizol)
Iran keji (2:QIAGEN RNeasy)
Iran kẹta (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Iru ọja wo ni o dara, iwọ yoo mọ nipa lafiwe
RNA fa jade ni lilo ohun elo Foregene
Ko nikan ga fojusi sugbon tun ti o dara iyege

2.qPCR aworan (aworan ti ampilifaya)

Iran akọkọ (Trizol)

Iran keji (buluu ọruntumo siQIAGEN RNeasy-, pupatumo siQIAGEN RNeasy +)

Iran kẹta (bulu tumo si Foregene, alawọ ewe tumo si QIAGEN RNeasy plus)

(Akiyesi: QIAGEN RNeasy-iran keji ti qPCR graph tumọ si pe kit naa ko ṣe afikun DNA ko si yọ idoti DNA kuro. Nitoribẹẹ, CT ga julọ ati pe abajade ko peye; QIAGEN RNeasy + tumọ si pe a ti ṣafikun DNase ati pe a ti yọ ibajẹ DNA kuro, abajade jẹ deede)

Boya o jẹ elekitirophoretogram tabi iwọn iwọn iwọn PCR iwọn, didara awọn ọja Foregene ko kere si awọn ọja ti a ko wọle si ajeji.