• facebook
  • ti sopọ mọ
  • youtube

1

Nipa isediwon RNA

Ọgbọn ọdun sẹyin, fun isediwon RNA, ohun ti a le ronu jẹ bii o ṣe le gba RNA pipe, sibẹsibẹ, ko si ibeere fun iyara isediwon (Imọ-ẹrọ iran akọkọ ti ọna Trizol ti a bi).Pẹlu imudojuiwọn aṣetunṣe ti imọ-ẹrọ isediwon RNA, ohun ti a le ṣe ko ni opin si gbigba awọn abajade.Nigba ti dojuko pẹlu awọn isediwon ti akọkọ-iran Trizol-orisun reagents, experimenters won ni gbogbo lelẹ nipasẹ awọn oniwe-cumbersome isẹ awọn igbesẹ;biotilejepe lẹhin ọpọlọpọ awọn iṣapeye ati awọn imotuntun, o tun gba akoko pupọ.Ni akoko kanna, awọn reagents Organic gẹgẹbi phenol ati chloroform nilo lati lo ninu ilana isediwon, eyiti o tun ṣe aabo aabo ti oṣiṣẹ ti o yẹ si iye kan.

2Mu daradara, rọrun ati ailewu

Wiwa daradara, irọrun ati ailewu ọja isediwon RNA ti di ibi-afẹde akọkọ ti awọn oludanwo.Nitorinaa, ọna adsorption Silica Spin Column fun isediwon RNA wa sinu jije.Awọn ọja isediwon RNA iran-kẹta ti Foregene fa lori awọn anfani ti awọn ọja isediwon ti iran ti tẹlẹ, ni lilo (DNA-Cleaning + RNA nikan) imọ-ẹrọ Spin Column meji lati yọ gDNA ati idoti tissu ni akoko kanna, laisi itọju DNase ti gDNA ti o ku, ati pe ko tun lo phenol, bbl Majele ati ipalara ti akoko kukuru, bi o ti jẹ pe akoko kukuru ti o lewu, ati ikore ti RNA ti o ga.

Isẹ ilana lafiwe chart

3

Àwòrán àfiwé àwọn àbájáde àdánwò

Foregene lapapọ ohun elo ipinya RNA ni ikore isediwon RNA giga, mimọ to dara, ati ipa isediwon ti miRNA dara ju awọn ohun elo ami iyasọtọ miiran lọ.

4

Electrophoresis ti 50 miligiramu ti ẹdọ eku lapapọ RNA ti a fa jade nipasẹ awọn ọna oriṣiriṣi
Iran akọkọ (1: Trizol)
Iran keji (2: ohun elo isediwon RNA lati ile-iṣẹ A)
Iran kẹta (3: ohun elo isediwon RNA pẹlu lati ile-iṣẹ A, 4: Foregene: Awọn ohun elo Ipinya RNA)

qPCR ayaworan (ayaworan ti amúṣantóbi ti)

DNA genomic gbọdọ yọkuro ni imunadoko lakoko isediwon RNA, bibẹẹkọ yoo ni awọn ipa ti ko ni idari lori awọn adanwo isalẹ (iye CT kutukutu, awọn idaniloju eke).Ohun elo iran-atẹle Foregene le yọ DNA genomic kuro ni pipe laisi afikun ti DNase, fifipamọ akoko pupọ, lakoko yago fun ibajẹ ti o fa nipasẹ ibajẹ RNase exogenous.
Iran akọkọ (alawọ ewe tọkasi TRlzol-, pupa tọkasi TRlzol +)

5Iran-keji (Blue tọkasi Ile-iṣẹ A RNA ohun elo isediwon -, pupa tọkasi Ohun elo isediwon Ile-iṣẹ A RNA +)

6

Iran kẹta (bulu tọkasi ile-iṣẹ A RNA ohun elo isediwon pẹlu, alawọ ewe tọkasi awọn ohun elo Ipinya Foregene RNA)

7

(Akiyesi: "_" ninu aworan qPCR tọkasi pe ko ti fi DNAse kun, ati pe a ko ti yọ idoti ti DNA kuro; "+" tọkasi pe a ti fi DNAse kun, ati pe a ti yọ ibajẹ DNA kuro)

Pari isediwon RNA laarin iṣẹju 11

Ko si iwulo fun awọn ọdun ti ikojọpọ iriri isediwon acid nucleic, iṣelọpọ giga-giga lapapọ lapapọ awọn ohun elo ipinya RNA awọn ọja le gba ọ laaye lati gba ikore giga ati RNA mimọ-giga laarin awọn iṣẹju 11 lati pade ọpọlọpọ awọn iwulo esiperimenta isalẹ.

9Titi di isisiyi, Foregene lapapọ awọn ohun elo jara isolaton RNA ti jẹ idanimọ nipasẹ nọmba nla ti awọn alabara ati ti ṣe alabapin si ọpọlọpọ awọn iwe igbelewọn giga.Lilo gangan ti alabara ti chart electrophoresis esi ati iwọn iwọn PCR ampilifaya lẹhin transcription yiyipada fihan pe RNA ti o jade nipasẹ lilo awọn ọja Foregene kii ṣe ga ni ifọkansi nikan, ṣugbọn tun ni iduroṣinṣin to dara.Imọ-ẹrọ ọja nikan ti o ti ni idanwo nipasẹ ọja le jẹ ojurere nipasẹ gbogbo eniyan.

1011

Cell Total RNA ipinya Apo

Ipese RNA giga

Yara: Pari Ipinya RNA ni iṣẹju 11

Aabo: Ko si kemikali Organic ti a ṣafikun

Diẹ ninu awọn itọka ti o ni idiyele giga:

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu, et al.Idinamọ ti gbogun ti gbogun ti awọn ọlọjẹ RNAi nipasẹ awọn peptides apẹrẹ ṣe aabo lati ikolu enteroviral ni vivo, Immunity, 54 (10), 2021: 2231-2244.e6.(IF: 31.745,Gbogun ti RNA Ipinya ApoOlogbo No.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Wang, A., Wu, D. et al.Idinamọ meji ti ajesara innate ati apoptosis nipasẹ amuaradagba cytomegalovirus eniyan UL37x1 jẹ ki ẹda ọlọjẹ daradara.Nat Microbiol 7, 1041-1053 (2022).(TI: 30.964,Cell Total RNA ipinya ApoOlogbo No.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6


Akoko ifiweranṣẹ: Jul-27-2022