Ohun elo Ipinya Ohun ọgbin Lapapọ RNA Pupọ Apo RNA Purificaiton fun Ohun ọgbin Ọlọrọ ni Polysaccharides ati Polyphenols
Apejuwe Apo:
Cat.No.RE-05021/05022/05024
Fun isọdọtun ti RNA lapapọ lati awọn ayẹwo ọgbin gbogbogbo ti o ni awọn polysaccharide giga ati awọn paati polyphenol.
Ni kiakia jade RNA lapapọ didara giga lati awọn ayẹwo ọgbin pẹlu akoonu giga ti polysaccharides ati polyphenols.
RNase-ọfẹ Lilo DNA-Cleaning Column
Rọrun-gbogbo awọn iṣẹ ṣiṣe ti pari ni iwọn otutu yara
Yara-iṣiṣẹ le pari ni ọgbọn iṣẹju
Ailewu-ko si reagent Organic ti a lo 
Awọn pato
Awọn igbaradi 50, Awọn igbaradi 200
Ohun elo naa nlo ọwọn alayipo ati agbekalẹ ti o dagbasoke nipasẹ Foregene, eyiti o le yọkuro daradara-mimọ giga ati didara lapapọ RNA lati ọpọlọpọ awọn sẹẹli ọgbin pẹlu awọn polysaccharides giga tabi akoonu polyphenols.O pese DNA-Cleaning iwe ti o le awọn iṣọrọ yọ genomic DNA lati supernatant ati àsopọ lysate.Iwe RNA-nikan le di RNA ni imunadoko.Ohun elo naa le ṣe ilana nọmba nla ti awọn ayẹwo ni akoko kanna.
Gbogbo eto ko ni RNase ninu, nitorinaa RNA ti a sọ di mimọ kii yoo bajẹ.Buffer PRW1 ati Buffer PRW2 le rii daju pe RNA ti o gba ko jẹ ibajẹ nipasẹ amuaradagba, DNA, ions, ati awọn agbo ogun Organic.
Awọn paati ohun elo
| Idaduro PSL1, saarin PS, saarin PSL2 |
| Ifipamọ PRW1, Ifipamọ PRW2 |
| RNase-Ọfẹ ddH2O, Àwòrán Ìmúkúrò DNA |
| RNA-Nikan iwe |
Awọn ẹya & awọn anfani
■ Ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ℃) jakejado gbogbo ilana, laisi iwẹ yinyin ati iwọn otutu kekere.
■ Ohun elo pipe RNase-ọfẹ, ko si ye lati ṣe aniyan nipa ibajẹ RNA.
■ Paapa dara fun isọdọtun ti RNA lati awọn ayẹwo ọgbin ti polysaccharides ati polyphenols.
■ Ẹwọn DNA-Cleaning ni pato sopọ mọ DNA, kit naa le yọ idoti DNA jinomiki laisi fifi DNase kun.
∎ Imujade RNA ti o ga: Iwe RNA-nikan ati agbekalẹ alailẹgbẹ le sọ RNA di mimọ daradara.
■ Iyara iyara: rọrun lati ṣiṣẹ ati pe o le pari laarin ọgbọn iṣẹju.
■ Aabo: ko nilo reagenti Organic ko nilo.
■ Didara to gaju: Awọn ajẹkù RNA ti a sọ di mimọ jẹ mimọ ti o ga, laisi amuaradagba ati awọn idoti miiran, ati pe o le pade ọpọlọpọ awọn ohun elo idanwo isale.
Ọja sile
■ Awọn ohun elo ti o wa ni isalẹ: iṣakojọpọ cDNA akọkọ-okun, RT-PCR, cloning molikula, Northern Blot, ati bẹbẹ lọ.
■ Ayẹwo: Alabapade tabi tutunini tissues ọgbin ti polysaccharides ati polyphenols
■ Dosage: 50mg ọgbin àsopọ
■ O pọju RNA abuda agbara ti ìwẹnumọ iwe: 80 μg
■ Iwọn didun: 50-200 μl
Ohun elo Kit
O dara fun isediwon ati isọdi ti RNA lapapọ lati awọn ayẹwo àsopọ ọgbin tuntun tabi tio tutunini (paapaa awọ ewe ewe ọgbin tuntun) pẹlu polysaccharide giga ati akoonu polyphenol.
Sisan iṣẹ
Aworan atọka
Ohun elo Ipinya Ohun ọgbin Lapapọ RNA Plus ṣe ilana 50mg ti awọn ewe tuntun ti polysaccharides ati awọn polyphenols, ati 5% RNA ti a sọ di mimọ jẹ idanwo nipasẹ elekitirogiroforesis.
1: ogede
2: Ginkgo
3: Owu
4: Pomegranate
Ibi ipamọ ati igbesi aye Selifu
Ohun elo yii le wa ni ipamọ fun awọn oṣu 24 labẹ awọn ipo gbigbẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ℃);ti o ba nilo lati wa ni ipamọ fun igba pipẹ, o le wa ni ipamọ ni 2-8 ℃.
Buffer PSL1 le gbe ni 4℃ fun oṣu kan lẹhin fifi β-mercaptoethanol kun (o gba ọ niyanju lati ṣafikun ni akoko kanna ti idanwo).
Awọn ọwọn edidi
Lẹhin ti awọn iwe edidi, ikore RNA dinku tabi paapaa ko ṣee ṣe lati sọ RNA di mimọ, ati pe iwọn RNA ti o gba ti lọ silẹ.
Itupalẹ idi ti o wọpọ:
1. Awọn fifọ ayẹwo ko ni kikun.
Iyatọ ayẹwo ko jẹ ki DNA-CLEANING COLUMN patapata ni idinamọ, lakoko ti o kan ikore RNA ati didara.A ṣeduro iṣẹ lilọ ni iyara ni omi nitrogen olomi ti o to nigbati o ba fọ awọn ayẹwo, Gbiyanju lati fọ ogiri sẹẹli ayẹwo, awọ ara sẹẹli ati awọn ara miiran.Fun awọn ayẹwo ọgbin ti polyol polysaccharides, a ṣeduro pe ki o lo Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
2. Nigbati o ba fa ayẹwo ti o ya sọtọ pẹlu Ọwọn DNA-Cleaning, itusilẹ sẹẹli ti o ṣee ṣe le jẹ fa simu.
Awọn gedegede fragmented gedegede ti o ya yoo fa RNA-ONLY Column eyiti yoo dina mọ nigbati iṣẹ adsorption RNA ba ṣe (wo igbesẹ 6).A ṣeduro rẹ ni iṣọra nigbati o ba mu alamọdaju yii lati yago fun mimu awọn idoti sẹẹli.
3. Ayẹwo ibẹrẹ iye jẹ pupọ.
Lilo ayẹwo ti o pọ julọ yoo ja si pipin ayẹwo ti ko pe tabi lysis sẹẹli ti ko pe nipasẹ Buffer PSL1, ti o yọrisi idinamọ ti ọwọn ìwẹnumọ nigba isọ.Ohun elo Ipinya Ohun-ọgbin Apapọ RNA Ọkọọkan ayẹwo iṣiṣẹ ti a sọ di mimọ jẹ miligiramu 50.Fun awọn ayẹwo ọgbin ti polyol polysaccharides, a ṣeduro pe ki o gbiyanju Plant Total RNA ISOLATION KIT PLUS.
4. Awọn iwọn otutu ti centrifuge jẹ kekere ju.
Gbogbo ipinya RNA ati ilana isọdọmọ ni a ṣe ni iwọn otutu yara (20-25°C), ayafi ti awọn ayẹwo àsopọ ti baje nipasẹ omi nitrogen.The otutu ti diẹ ninu awọn cryogenic centrifuges ni kekere ju 20℃, eyi ti o le fa idinamọ ti DNA-Cleaning Column ati/tabi RNA-Nikan Ọwọn.Ti eyi ba ṣẹlẹ, ṣeto iwọn otutu centrifuge si 20-25℃, atirii daju pe adalu lysis ati/tabi elepo ti ethanol ti a fi kun ti jẹ preheated si 37°C.
Ko si RNA jade tabi ikore RNA ti lọ silẹ
Nigbagbogbo ọpọlọpọ awọn okunfa ti o ni ipa lori ṣiṣe imularada, gẹgẹbi: akoonu RNA ayẹwo, ọna ṣiṣe, iwọn didun elution, ati bẹbẹ lọ.
Itupalẹ awọn idi ti o wọpọ bi atẹle:
1.An yinyin wẹ tabi iwọn otutu kekere (4 ° C) centrifugation ti a ṣe lakoko iṣẹ naa.
Imọran: Ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25°C) ni gbogbo ilana, maṣe ṣe iwẹ yinyin ati iwọn otutu kekere.
2.The RNA ti a ti degraded nitori aibojumu itoju ti awọn ayẹwo tabi gun-igba itoju ti awọn ayẹwo.
Iṣeduro: Awọn ayẹwo ti a gba tuntun yẹ ki o wa ni didi ni iyara omi nitrogen, ati lẹhinna fipamọ ni -80 ° C fun igba pipẹ, yago fun didi didi ati thawing ti awọn ayẹwo;tabi lẹsẹkẹsẹ Rẹ awọn ayẹwo ni RNA amuduro RNAlater ojutu (awọn ayẹwo eranko).
3.Insufficient ayẹwo Fragmentation ati lysis asiwaju si blockage ti awọn ìwẹnumọ iwe.
Imọran: Nigbati o ba n lọ àsopọ, jọwọ rii daju pe àsopọ naa ti wa ni ilẹ to, ki o si gbe lọ ni kiakia si Buffer PSL1 ti a ti ṣetan tẹlẹ (jẹrisi pe a ti fi kun deede ti β-ME, wo igbesẹ 1 ti ilana naa).
4.The eluent ti a fi kun ti ko tọ.
Imọran: Rii daju pe RNase-Ọfẹ ddH2O ti lọ silẹ si aarin awọ ara iwe ìwẹnumọ.
5.The ti o tọ iwọn didun ti absolute ethanol ko fi kun si Buffer PSL2 tabi Buffer PRW2.
Imọran: Jọwọ tẹle awọn itọnisọna, ṣafikun iwọn didun to pe ti ethanol pipe si Buffer PSL2 ati Buffer PRW2 ki o dapọ daradara ṣaaju lilo ohun elo naa.
6.The iye ti àsopọ ayẹwo ni sedede.
Imọran: Lo 50 miligiramu tissu fun 500 μl ti Buffer PSL1.Lilo ohun elo ti o pọ ju yoo dinku iye RNA ti o jade ati mimọ ti RNA ti o yọrisi yoo tun dinku.A ṣeduro ni iyanju pe iwọn lilo ayẹwo akọkọ ko yẹ ki o kọja miligiramu 50 fun iṣẹ ṣiṣe isediwon RNA.
7.Inappropriate elution iwọn didun tabi pipe elution.
Imọran: Iwọn eluent ti iwe mimọ jẹ 50-200 μl;ti ipa elution ko ba ni itẹlọrun, o gba ọ niyanju lati fa akoko sii ni iwọn otutu yara lẹhin fifi RNase-ọfẹ ddH2O ti o ti ṣaju, bii 5-10min.
8.The ìwẹnumọ iwe ni o ni ethanol aloku lẹhin fifọ pẹlu BufferPRW2.
Imọran: Ti tube ti o ṣofo ti wa ni centrifuged fun iṣẹju 1 ati pe ethanol tun wa lẹhin fifọ ni Buffer PRW2, o le mu akoko ti centrifugation tube ti o ṣofo pọ si iṣẹju 2, tabi gbe ọwọn iwẹnumọ ni iwọn otutu yara fun iṣẹju 5 lati yọ ethanol iyokù kuro ni kikun.
9.The kit ti a lo ti ko tọ.
Imọran: Fun awọn apẹẹrẹ ọgbin ti polysaccharides polyphenolic, lilo awọn ohun elo ti o wọpọ gẹgẹbi Ohun elo Ipinpin RNA Lapapọ le ma ni anfani lati gba awọn ayẹwo RNA pipe.A ṣeduro ọ lati lo Lapapọ Plant RNA IsolationKit Plus, eyiti o jẹ apẹrẹ pataki fun awọn ayẹwo ọgbin polyphenolic polysaccharide.Ohun elo kan ni pataki ni idagbasoke fun yiyo RNA lati polyphenol ati awọn ayẹwo ọgbin polysaccharide.
OD260/OD280 iye ti wa ni kekere
RNA elution pẹlu ddH2O ati lilo fun awọn abajade kika spectrophotometer ni awọn iye OD260/OD280 kekere.A ṣeduro lilo 10 mM Tris-HCl, pH 7.5 (dipo RNase-Free ddH2O si elute RNA) lati gba awọn iye OD260/OD280 ti o peye, wo “RNA Concentration and Purification Assays” ni oju-iwe 19.
RNA ti a sọ di mimọ ti bajẹ
Didara RNA ti a sọ di mimọ jẹ ibatan si awọn nkan bii itọju ayẹwo, ibajẹ RNase, ati ifọwọyi.
Itupalẹ awọn idi ti o wọpọ:
Awọn ayẹwo 1.Tissue ko ni ipamọ ni akoko lẹhin gbigba.
Iṣeduro: Ti a ko ba lo awọn ayẹwo ara ni akoko lẹhin ikojọpọ, jọwọ fi wọn pamọ sinu omi nitrogen ni iwọn otutu kekere lẹsẹkẹsẹ tabi gbe wọn lọ si -80 ° C fun ibi ipamọ igba pipẹ lẹhin didi ni iyara ni nitrogen olomi, tabi lẹsẹkẹsẹ fi awọn ayẹwo sinu ojutu RNA stabilizer RNAlater (awọn ayẹwo ẹranko).Fun isediwon RNA, gbiyanju lati lo awọn ayẹwo àsopọ titun ti a gba.
2.Repeated didi ati thawing ti àsopọ ayẹwo.
Imọran: Nigbati o ba tọju awọn ayẹwo ti ara, o dara julọ lati ge wọn si awọn ege kekere fun itoju, ati mu apakan kan jade nigba lilo wọn lati yago fun ibajẹ RNA ti o ṣẹlẹ nipasẹ didi leralera ati thawing ti awọn ayẹwo.
3.RNase ti ṣe afihan ni yara iṣiṣẹ tabi ko wọ awọn ibọwọ isọnu, awọn iboju iparada, ati bẹbẹ lọ.
Imọran: Awọn adanwo isediwon RNA ni a ṣe dara julọ ni awọn iṣẹ RNA lọtọ, ati pe tabili yàrá yẹ ki o di mimọ ṣaaju idanwo naa, ati pe awọn ibọwọ isọnu ati awọn iboju iparada yẹ ki o wọ lakoko idanwo naa lati yago fun ibajẹ RNA ti o ṣẹlẹ nipasẹ ifihan RNase si iwọn nla julọ.
4.The reagent ti wa ni ti doti nipasẹ RNase nigba lilo.
Aba: Rọpo pẹlu jara tuntun ti awọn ohun elo isediwon RNA lapapọ fun awọn idanwo ti o jọmọ.
5.Awọn tubes centrifuge ati awọn imọran pipette ti a lo fun ifọwọyi RNA ti doti pẹlu RNase.
Imọran: Rii daju pe awọn tubes centrifuge, awọn imọran pipette, pipettes, ati bẹbẹ lọ ti a lo ninu isediwon RNA jẹ gbogbo RNase-ọfẹ.
Awọn itọnisọna itọnisọna:
Ohun ọgbin Total RNA ipinya Apo Plus Ilana itọnisọna
