Awọn onkọwe: Wang Xiaoyan, Zhao Eryu

Ẹka: Ile-iwosan Jiaozhou, Ile-iwosan Dongfang ti o somọ si Ile-ẹkọ giga Tongji

Ni lọwọlọwọ, oriṣi apẹẹrẹ akọkọ fun wiwa atẹgun nucleic acid pathogen jẹ swab ọfun.Ọpọlọpọ awọn iru awọn solusan itọju apẹẹrẹ ti o wọpọ lo wa, gbogbo eyiti o nilo lati wa ni firiji tabi didi fun gbigbe ati ibi ipamọ;O nira lati ṣakoso gbogbo ilana ti iwọn otutu kekere lakoko gbigba ati ilana gbigbe, ati pe o nira lati rii daju iṣakoso didara ṣaaju idanwo ayẹwo^[1-2].

RNase (RNase) jẹ endonuclease ti o ṣe hydrolyzes RNA, ni pataki pipin awọn iwe phosphodiester laarin awọn nucleotides.Molikula RNase jẹ iduroṣinṣin pupọ, awọn ifunmọ disulfide wa ninu eto naa, ati pe iṣẹ ṣiṣe ko nilo wiwa awọn cations divalent, nitorinaa RNase ko ni irọrun denatured, ati pe o rọrun lati tun pada paapaa lẹhin iwọn otutu giga tabi lilo awọn denaturants.RNases ti pin si endogenous ati exogenous eyi.Awọn RNases endogenous le ṣe idasilẹ ni akoko kanna nigbati awọn sẹẹli ba ya.Nitorinaa, imukuro ipa ti awọn RNases endogenous jẹ igbesẹ to ṣe pataki pupọ ninu ilana isediwon RNA.Awọn RNases Exogenous ti pin kaakiri.Awọn RNases wa ninu afẹfẹ, awọ ara eniyan, irun ati itọ, eyiti o jẹ awọn idi pataki fun ibajẹ RNA ti o rọrun.^[3].

Ibeere data

CANS-CL02-A009 "Awọn ohun elo ti Didara Ile-iwosan Iṣoogun ati Awọn Itọsọna Imudaniloju Imudaniloju ni aaye ti Ayẹwo Molecular" ni awọn ibeere imọ-ẹrọ ṣe imọran pe awọn iṣedede didara omi ti o yẹ yẹ ki o ṣe agbekalẹ gẹgẹbi ohun elo naa;Awọn apoti isọnu afẹfẹ:

RNase / Iyasọtọ

(1) RNase A

Ribonuclease A (RNase A), yo lati inu bovine ti oronro, jẹ ẹya endoribonuclease ti o le ni pato kolu 3′ opin pyrimidine iṣẹku lori RNA, gige cytosine tabi uracil akoso nipa nitosi nucleotides.Isopọ phosphodiester, ọja ikẹhin ti iṣesi jẹ 3′ pyrimidine nucleotide ati oligonucleotide kan pẹlu 3′ pyrimidine nucleotide ni ipari.

(2) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) ti wa lati Aspergillus orjzae, o ṣe pataki lori 3'-terminal fosifeti ti guanine, ati aaye cleavage jẹ laarin 3' fosifeti ti guanine ati 5' hydroxyl ti awọn nucleotides ti o wa nitosi.Ọja ikẹhin ti iṣesi jẹ 3′guanylic acid ati awọn ajẹkù oligonucleotide pẹlu 3′guanylic acid ni ipari.

(3) RNase H

Ribonuclease H (RNase H) ni a kọkọ ṣe awari lati inu ẹran ara malu thymus, ati pe a ti sọ apilẹṣẹ koodu rẹ sinu Escherichia coli.O le sọ DNA di pataki ni pataki: awọn okun RNA ni awọn duplexes arabara RNA, ti o fa awọn oligonucleotides ati awọn mononucleotides pẹlu awọn opin 3′-OH ati 5′-monophosphate, ko le dinku ẹyọkan tabi DNA ti o ni okun meji tabi RNA.

RNase

Iṣẹ ati lilo

Ribonuclease le jẹ ki ibajẹ ribonucleic acid (RNA) jẹ ati pe o le ṣepọ ni atọwọda.A lo ikunra oogun ni oke lati tọju ibalokanjẹ ati irora apapọ.Ni ibamu si awọn iroyin, ribonuclease le yi ogun cell ti iṣelọpọ agbara, dena kokoro kolaginni, dojuti awọn afikun ti aarun ayọkẹlẹ kokoro ni fitiro, ki o si dojuti awọn Ibiyi ti vaccinia ati Herpes kokoro ni adie oyun.Lilo ile-iwosan ti ribonuclease ojoojumọ abẹrẹ intramuscular ti 180 miligiramu, ti o ni anfani si itọju ti encephalitis ajakale-arun, ribonuclease le fa ibajẹ ti ribonucleic acid (RNA), ati pe o le ni iṣelọpọ ti atọwọda bayi.A lo ikunra oogun ni oke lati tọju ibalokanjẹ ati irora apapọ.Ni ibamu si awọn iroyin, ribonuclease le yi ogun cell ti iṣelọpọ agbara, dena kokoro kolaginni, dojuti awọn afikun ti aarun ayọkẹlẹ kokoro ni fitiro, ki o si dojuti awọn Ibiyi ti vaccinia ati Herpes kokoro ni adie oyun.Lilo ile-iwosan ti ribonuclease ojoojumọ abẹrẹ inu iṣan ti 180 miligiramu jẹ anfani fun itọju ti encephalitis ajakale-arun.

RNase

Inhibitor Definition

Itumọ ti ẹya inhibitor RNase: Iye enzymu ti a beere lati dojuti 50% ti iṣẹ ṣiṣe ti 5ng RNase A jẹ ẹyọ kan.

Bawo ni RNase Inhibitors Ṣiṣẹ

Guanidine isothiocyanate:

Guanidine isothiocyanate jẹ agbo-ara Organic pẹlu agbekalẹ molikula C2H6N4S.Ni akọkọ ti a lo ninu oogun ti ibi, awọn reagents kemikali, ati bẹbẹ lọ Guanidine isothiocyanate jẹ aṣoju lysing amuaradagba, ati pe o nigbagbogbo lo bi paati akọkọ ti ojutu lysis ninu awọn reagents iwadii molikula.O le lyse àsopọ, run cell be ati dissociate nucleic acid lati nucleoprotein, ati ki o ni lagbara denaturation to RNase.O jẹ oludena RNase ti o munadoko julọ ni lọwọlọwọ.

TRIzol jẹ aramada lapapọ RNA isediwon reagent ti o le jade taara RNA lapapọ lati awọn sẹẹli tabi awọn ara.O ni awọn nkan bii phenol ati guanidine isothiocyanate, eyiti o le fa awọn sẹẹli run ni iyara ati dena awọn iparun ti a tu silẹ nipasẹ awọn sẹẹli.

(Sibẹsibẹ, guanidine isothiocyanate jẹ eewu fun ilera awọn oniwadi laabu.)

RNasin:

Glycoprotein acid ti a fa jade lati ẹdọ eku tabi blastoderm eniyan.Rnasin jẹ inhibitor ti kii ṣe idije ti RNase, eyiti o le sopọ mọ ọpọlọpọ awọn RNases lati mu wọn ṣiṣẹ.

(Awọn alaye diẹ sii: https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hotutu otutu:

Iwọn otutu ti o ga tun jẹ ọna ti o wọpọ fun denaturation amuaradagba.

Diethylpirocarbonate (DEPC):

DEPC jẹ oludena RNase ti o lagbara ṣugbọn ti ko pe, eyiti o le ṣe idiwọ iṣẹ RNase nipa apapọ pẹlu amino acid imidazole oruka ti ẹgbẹ RNase ti nṣiṣe lọwọ si awọn ọlọjẹ denature.

eka Vanadyl ribonucleoside:

eka kan ti a ṣẹda nipasẹ awọn ions vanadium oxide ati awọn nucleosides, eyiti o sopọ mọ RNase ni irisi awọn nkan iyipada, eyiti o le ṣe idiwọ iṣẹ ṣiṣe ti RNase patapata.

miiran:

SDS, urea, diatomaceous earth, bbl tun ni ipa idinamọ kan lori RNase.

iwé Reviews

Li Yujie Oloye Onimọn ẹrọ

Oludari ti Ẹka yàrá, Ile-iwosan Jiaozhou, Ile-iwosan Dongfang ti o somọ si Ile-ẹkọ giga Tongji

Lati le ṣe idiwọ biodegradation ti RNase exogenous, awọn iboju iparada, awọn ibọwọ ati awọn fila yẹ ki o wọ ati rọpo nigbagbogbo lakoko ilana isediwon RNA.Gbogbo awọn ohun elo gilasi gbọdọ wa ni ndin ni adiro gbigbe ni 200 ° C fun diẹ ẹ sii ju wakati 2 lọ.Awọn ohun elo ti a lo fun yan, gẹgẹbi ṣiṣu, nilo lati ṣe itọju pẹlu omi DEPC, lẹhinna wẹ pẹlu omi distilled.Awọn reagents tabi awọn ẹrọ ti a lo fun isediwon, titọju ati idanimọ ti RNA yẹ ki o jẹ igbẹhin si RNA, ati agbegbe iṣẹ RNA ominira yẹ ki o ṣeto.

awọn itọkasi:

[1] Smith-Vaughan HC, Binks MJ, Beissbarth J, ati al.Awọn kokoro arun ati awọn ọlọjẹ ninu nasopharynx lẹsẹkẹsẹ ṣaaju ibẹrẹ ti awọn akoran atẹgun kekere ti o tobi ni awọn ọmọ abinibi Ilu Ọstrelia[J].Eur J Clin Microbiol Arun Dis,2018,37 (9): 1785-1794.

[2] Ẹka Iṣakoso Ikolu Ile-iwosan ti Ẹgbẹ Oogun Idena Kannada.Awọn itọnisọna fun ikojọpọ ati ayewo ti awọn apẹrẹ microbial ile-iwosan [J].Iwe akọọlẹ Kannada ti Ikolu Ile-iwosan, 2018 (20): 3192-3200.

[3] “Idanwo Ile-iwosan Ẹgbẹẹgbẹrun Idi ti Iwọn Iwọn Idanwo Biology Molecular”