• facebook
  • ti sopọ mọ
  • youtube

Ẹya ti o tayọ ti iṣesi PCR jẹ agbara imudara nla rẹ ati ifamọ giga julọ.Lati le mu ilọsiwaju PCR ṣiṣẹ ati ṣiṣe wiwa, a ti pinnu lati ni ilọsiwaju agbara imudara PCR ati ifamọra wiwa, ṣugbọn orififo wa ninu ilana idanwo naa.Awọn idaniloju eke nigbagbogbo waye, ati pe iwọn kekere pupọ ti ibajẹ-agbelebu ayẹwo tabi ibajẹ ọja PCR le fa awọn idaniloju eke ni idanwo naa.

Awọn oriṣi marun ti ibajẹ ọja PCR

Awọn idi pupọ lo wa fun ibajẹ PCR, eyiti o le pin ni aijọju si awọn ẹka wọnyi:

1. Agbelebu-kontaminesonu laarin awọn apẹrẹ

1.1

Ibajẹ apẹrẹ jẹ eyiti o fa nipasẹ idoti ti apoti fun gbigba apẹrẹ, tabi nigbati a ba gbe apẹrẹ naa, a ti jo jade kuro ninu apoti nitori edidi alaimuṣinṣin, tabi apẹrẹ naa ti faramọ si ita ti eiyan naa, eyiti o fa ibajẹ agbelebu;Idibajẹ nyorisi ibajẹ laarin awọn apẹẹrẹ;diẹ ninu awọn apẹẹrẹ microbial, paapaa awọn ọlọjẹ, le tan kaakiri pẹlu awọn aerosols tabi ṣe awọn aerosols, ti o yorisi ibajẹ laarin ara wọn.

2. PCR reagent kontaminesonu

Idi akọkọ ni pe lakoko igbaradi ti awọn reagents PCR, ibon ayẹwo, eiyan, omi distilled meji ati awọn solusan miiran ti doti nipasẹ awoṣe PCR nucleic acid.

1.2

3.Cloning plasmid idoti

1.3

Ninu awọn ile-iṣere isedale molikula ati diẹ ninu awọn ile-iṣẹ ti o lo awọn plasmids cloned bi awọn idari rere, iṣoro ti kontaminesonu plasmid cloned tun wọpọ.Nitori akoonu ti cloning plasmid ni iwọn iwọn iwọn ga julọ, ati pe awọn irinṣẹ ati awọn reagents diẹ sii ni a nilo ninu ilana isọdọmọ, ati pe plasmid ninu awọn sẹẹli alãye ni o ṣee ṣe pupọ lati doti nitori idagbasoke to lagbara ati agbara ẹda ti awọn sẹẹli alãye.

4.Ibajẹ ti awọn ọja ti o pọ si

Ibajẹ ti awọn ọja imudara jẹ iṣoro ibajẹ ti o wọpọ julọ ni awọn aati PCR.Nitori iwọn ẹda ti ọja PCR tobi (ni gbogbogbo 1013 awọn adakọ/milimita), eyiti o ga pupọ ju opin nọmba ẹda adakọ PCR, iye kekere pupọ ti ibajẹ ọja PCR le fa awọn idaniloju eke.

1.4

5.Aerosol idoti

1.5

Idoti Aerosol jẹ fọọmu ti o ṣeeṣe julọ ti ibajẹ ti awọn ọja PCR, ati pe o tun rọrun julọ lati fojufoda.O ti ṣẹda nipasẹ ija laarin oju omi ati afẹfẹ.Ni gbogbogbo, aerosol kontaminesonu le ti wa ni akoso nigbati awọn ideri ti wa ni šiši, nigbati awọn ayẹwo ti wa ni aspirated, tabi paapa nigbati awọn lenu tube ti wa ni mì vigorously.Gẹgẹbi awọn iṣiro, patiku aerosol le ni awọn ẹda 48,000, nitorina idoti ti o ṣẹlẹ nipasẹ rẹ jẹ iṣoro ti o yẹ akiyesi pataki.

Ni pataki, awọn ile-iṣẹ idanwo nigbagbogbo lo bata ti alakoko kanna lati ṣe idanwo jiini kan.Ni akoko pupọ, iye nla ti ibajẹ ọja PCR yoo waye ni aaye yàrá.Ni kete ti iru ibajẹ ba waye, o nira lati mu kuro ni igba diẹ.

Fun awọn oriṣi mẹta akọkọ ti idoti, a le lo awọn ọna ti o munadoko lati yago fun, ṣugbọn idoti ti o ṣẹlẹ nipasẹ awọn ọja PCR nira lati yago fun, paapaa ni ikole ti awọn ile-iṣẹ PCR ti kii ṣe deede.Ninu ilana PCR, nigbati ipari pipette ba fa ati fifun omi, ati pe a ṣii ideri tube PCR, aerosol yoo ṣẹda.Awọn moleku DNA ti aerosol gbe (aerosol kan le gbe ẹgbẹẹgbẹrun DNA) nira lati parẹ nitori pe wọn leefofo ninu afẹfẹ.Ni kete ti a ti ṣafihan iyipo atẹle ti awọn adanwo PCR, awọn idaniloju eke yoo ṣẹlẹ laiseaniani.

Gẹgẹbi a ṣe han ninu nọmba ti o wa ni isalẹ, iṣakoso odi tun ṣe alekun ẹgbẹ anfani ti o baamu:

1.6

Apa akọkọ ti ọran yii ti idoti PCR ati idena ti ṣafihan nibi.Ọrọ atẹle yoo mu apakan keji wa fun ọ ni “Idena ti ibajẹ ọja PCR”, nitorinaa duro aifwy!


Akoko ifiweranṣẹ: Jul-25-2017