1: Rọpo awọn ipese esiperimenta ni akoko

Ṣeto (NTC) iṣakoso odi ati tun ṣe ni igba pupọ.Ni kete ti o ba rii pe ibajẹ ọja PCR wa ninu yàrá yàrá, rọpo gbogbo awọn ipese idanwo ni akoko.Iru bii: tun-dilute ati mura awọn alakoko, tun-sterilize sample pipette, EP tube, ddH2O, ati bẹbẹ lọ, rọpo pẹlu pipette tuntun kan, ati yawo awọn ile-iṣẹ miiran fun igba diẹ lati ṣe awọn idanwo PCR.Yàrá ti a ti doti yoo jẹ ategun ati itanna pẹlu awọn egungun ultraviolet titi ti koti ọja PCR yoo yọkuro ṣaaju tẹsiwaju pẹlu idanwo naa.

2: Fa akoko ifihan UV pọ si

O tọ lati ṣe akiyesi pe lati yọ idoti DNA kuro, itanna ultraviolet deede yẹ ki o faagun nipasẹ awọn wakati 2 ju igbagbogbo lọ.Paapaa nitorinaa, ipa ti itanna UV lori yiyọ awọn ajẹkù kekere (ni isalẹ 200bp) ti ibajẹ DNA ko tun dara.

Ultraviolet weful (nm) ni gbogbogbo 254/300nm, ati pe o to lati tan ina fun ọgbọn išẹju 30.O yẹ ki o ṣe akiyesi pe nigbati o yan UV lati yọkuro idoti ti awọn ọja PCR ti o ku, ipari ti ọja PCR ati pinpin awọn ipilẹ ni ọkọọkan ọja yẹ ki o gbero.Itọpa UV jẹ doko nikan fun awọn ajẹkù gigun ju 500 bp, ati pe o ni ipa diẹ lori awọn ajẹkù kukuru.

Lakoko itanna UV, awọn ipilẹ pyrimidine ninu ọja PCR yoo ṣe awọn dimers.Awọn dimers wọnyi le fopin si itẹsiwaju, ṣugbọn kii ṣe gbogbo awọn pyrimidine ninu pq DNA le ṣe awọn dimers, ati itanna UV tun le fọ awọn dimers..Iwọn idasile dimer da lori iwọn igbi UV, iru dimer pyrimidine ati ọna ti awọn nucleotides ti o wa nitosi aaye dimer.Nitorinaa, ti awọn ajẹkù pipọ PCR kere, o gba ọ niyanju lati lo eto idoti ọja UNG anti-PCR.

3: Awọn apanirun idoti DNA ti a lo ni igbagbogbo

Aerosols ti wa ni awọn iṣọrọ ti ipilẹṣẹ nigbati pipettes ti wa ni afikun, eyi ti o jẹ soro lati yago fun, ati awọn ti o yoo yanju ni kiakia.Nitorinaa, laiseaniani o jẹ yiyan ti o dara lati nigbagbogbo lo awọn apanirun idoti DNA pataki lati ṣe idiwọ itankale idoti DNA.

4: Lo UNG eto egboogi-idoti

Lẹhin ti o ti yọkuro ibajẹ ọja PCR, yàrá idanwo le lo eto idoti ọja UNG anti-PCR lati ṣe idiwọ ibajẹ ọja PCR.Ni awọn ile-iṣere gbogbogbo, o le ṣe awọn ipin idanwo ti o rọrun, ya sọtọ agbegbe ọja PCR lati awọn agbegbe miiran, fi idi awọn ofin ati ilana yàrá kan mulẹ, ati ṣe ikẹkọ ti o yẹ lati ṣe idiwọ iṣẹlẹ ti ibajẹ ọja PCR.

Awọn iṣeduro: Ṣiṣeto ile-iyẹwu PCR ti o tọ, mimu agbegbe PCR ti o dara, ṣiṣe agbekalẹ awọn ilana ṣiṣe PCR boṣewa, ati gbigbin mimọ iṣẹ ṣiṣe ti awọn aladanwo jẹ awọn bọtini lati ṣe idiwọ tabi idinku idoti ti awọn adanwo PCR.