Ṣe agbekalẹ idanwo PCR SOP lati ṣe idiwọn ihuwasi ti oṣiṣẹ idanwo.
Oluṣewadii naa muna ni ibamu pẹlu awọn ilana ṣiṣe, ati pe o dinku idoti PCR ti o le fa nipasẹ awọn nkan eniyan tabi ṣe idiwọ iṣẹlẹ ti idoti.Ni afikun, oluyẹwo yẹ ki o ni oye ati oye ọjọgbọn ti o baamu, pẹlu pipe ni ṣiṣe awọn ohun elo ti o ni ibatan, ṣiṣe alaye gbogbo ilana iṣẹ, mimu awọn ọna itọju ti idoti ati awọn ọna iṣakoso didara yàrá, ati ni anfani lati tumọ awọn abajade idanwo ni deede.
Fi idi kan boṣewa PCR yàrá.
Ile-iṣẹ PCR ti pin si awọn agbegbe mẹrin ni ipilẹ, eyun agbegbe igbaradi reagent, agbegbe iṣelọpọ ayẹwo, agbegbe imudara, ati agbegbe itupalẹ ọja imudara.Awọn agbegbe meji akọkọ jẹ awọn agbegbe iṣaju-iṣaaju, ati awọn agbegbe meji ti o kẹhin jẹ awọn agbegbe imudara ifiweranṣẹ.Agbegbe iṣaju iṣaju ati agbegbe imudara yẹ ki o wa niya muna.Awọn ohun elo idanwo, awọn reagents, iwe gbigbasilẹ, awọn aaye, awọn ohun elo mimọ, ati bẹbẹ lọ, le ṣan lati agbegbe iṣaju-iṣaaju si agbegbe ifilọ-ifiweranṣẹ, iyẹn ni, lati agbegbe igbaradi reagent → agbegbe processing ayẹwo → agbegbe imudara → agbegbe itupalẹ ọja, ati pe ko gbọdọ ṣàn sẹhin.Ṣiṣan afẹfẹ ninu ile-iyẹwu yẹ ki o tun ṣan lati agbegbe iṣaju-iṣaaju si agbegbe-ifiweranṣẹ, ati pe ko san sẹhin.Apẹrẹ yàrá PCR ti o dara julọ ti han ni isalẹ:
Nọmba A: Ipo iṣeto yàrá PCR ti o dara julọ pẹlu titẹ odi ninu yara ifipamọ
Nọmba B: Ipo iṣeto yàrá PCR ti o dara julọ pẹlu titẹ rere ninu yara ifipamọ
Awọn aworan iṣeto yàrá PCR ti a fun ni Nọmba A ati Nọmba B yẹ ki o jẹ ipo iṣeto ti o dara julọ, ati yàrá pẹlu awọn ipo le tọka si ipo yii fun apẹrẹ.Fun awọn ile-iṣere lasan, a gba ọ niyanju pe agbegbe imudara PCR ati agbegbe itupalẹ ọja le yapa, ati ṣiṣi ideri yẹ ki o dinku bi o ti ṣee ṣe ni agbegbe igbaradi ayẹwo ati agbegbe imudara PCR.Ranti: Awọn ọja ati awọn ipese esiperimenta ni agbegbe itupalẹ ọja jẹ eewọ ni muna lati mu lọ si agbegbe igbaradi ayẹwo ati agbegbe imudara PCR.
Ti ile-iyẹwu naa ba ṣe wiwa PCR nikan ati idanimọ, o gba ọ niyanju lati lo PCR pipo fluorescent dipo PCR ti aṣa.
Awọn abajade wiwa PCR pipo fluorescence ni a le gba ati itupalẹ nipasẹ awọn ifihan agbara fluorescence, nitorinaa ko si iwulo lati ṣii ideri fun electrophoresis lẹhin ifura, eyiti o yago fun ibajẹ ọja PCR ti o fa nipasẹ jijo ti awọn ọja ifaseyin lati dagba awọn aerosols.Ti o ba pọ si nọmba awọn ṣiṣi fila lakoko igbesẹ ikojọpọ ti gel electrophoresis, ibajẹ aerosol le ṣẹlẹ.O ti wa ni niyanju lati se igbelaruge awọn ohun elo ti pipo PCR ki o si maa ropo PCR didara.
Eto idoti ọja UNG anti-PCR jẹ lilo fun esi PCR.
Eto naa nlo dUTP dipo dTTP.Lẹhin iṣesi PCR, gbogbo awọn ọja PCR (awọn ajẹkù DNA) ni a dapọ pẹlu dUTP;ni ipele ti o tẹle ti iṣesi PCR, enzymu UNG ti a fi kun si eto naa jẹ idabobo ni 37 ° C fun awọn iṣẹju 5 ṣaaju PCR, eyiti o le ṣe pataki degrade gbogbo awọn ajẹkù DNA ti o ni dUTP, ati lẹhinna ṣe iṣe PCR.Eyi le yọkuro patapata ibajẹ aerosol ti o fa nipasẹ awọn ọja PCR.Ipa naa han ni aworan ni isalẹ:
Akiyesi: Fun jara PCR taara, o le yan awọn ọja jara ti eto ibajẹ ọja anti-PCR ti ForegeneDabaa
Fun awọn ile-iṣere ti o ṣe idanwo genotyping iwọn-nla, o gbaniyanju ni pataki lati lo eto idoti ọja UNG anti-PCR fun awọn atunto idanwo ni afikun si ikole ti awọn ile-iṣẹ oye.
Olurannileti: Lilo eto yii ko le yọkuro ibajẹ ọja PCR ti o ti ṣẹlẹ tẹlẹ.Nitorinaa, eto UNG yẹ ki o lo ni ibẹrẹ idanwo ti o yẹ, ati pe eto UNG yẹ ki o lo fun imudara PCR, nitorinaa lati ṣe idiwọ ibajẹ ti awọn ọja PCR Eke rere.
A gba ọ niyanju lati lo eto taara PCR-UNG ti Foregene nigbati o ba nṣe idanwo iwọn-nla, gẹgẹbi:
Eweko Ewebe Taara Ohun elo PCR-UNG;
Irugbin ọgbin taara Kit-UNG;
Tissue Animal Direct Kit-UNG;
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;
Eja Abila Dari PCR Kit-UNG.
Yi jara ti irin ise lati Foregeneko le ṣe wiwa PCR nikan ni iyara ati ni iwọn nla, ṣugbọn tun ṣe idiwọ ati ṣakoso ibajẹ ọja PCR daradara.
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹta-19-2021
