Elo ni o mọ

Nipa Nucleic acid isediwon

Ibẹrẹ ati opin acid nucleic mimọ

Ohun gbogbo nira ni ibẹrẹ, acid nucleic ti a sọ di mimọ julọ

Bibẹrẹ ti awọn adanwo molikula, fun awọn adanwo ti o tẹle

Aṣeyọri tabi ikuna ni ipa pataki.

Trace/ultra-trace UV spectrophotometer jẹ ojurere nipasẹ ọpọlọpọ awọn oniwadi onimọ-jinlẹ nitori pe o le rii ifọkansi acid nucleic ati amuaradagba ati awọn iṣẹku ion iyọ ni irọrun, ni iyara ati ni ọrọ-aje.

Gẹgẹbi gbogbo wa ṣe mọ, A260 tumọ si gbigba ifọkansi acid nucleic OD iye, A280 tumọ si ifọkansi ifọkansi amuaradagba OD iye, A230 tumọ si ifọkansi ifọkansi iyọ OD iye OD, nitorinaa A260 le ṣe iyipada ifọkansi acid nucleic, A260/280 tumọ si iyoku amuaradagba, A260/230 tumọ si iyọkuro iyọ iyọ, ati pe o kan awọn abajade ti o da lori awọn abajade ti awọn abajade iwadi lori iwọn lilo nla kan.mora"lati gbagbọ pe o le ṣe alaye mimọ ti DNA ati RNA sikan awọn iye.Kii ṣe boṣewa nikan fun idanimọ ti ikore acid nucleic ati mimọ, o jẹ lilo nikan bi itọkasi, ati pe kii ṣe “boṣewa goolu”.

Itọsọna Thermo Fisher ND-2000 tẹnumọ igbẹkẹle ti awọn abajade idanwo naa

Idi ni pe awọn abajade ti o gba nipasẹ lilo micro / ultramicro UV spectrophotometer nikan ṣe afihan ikore ati mimọ ti nucleic acid lati ẹgbẹ, ati pe ọpọlọpọ awọn okunfa ipa (ọna opiti, iwọn ayẹwo, ifọkansi ayẹwo, iye pH, awọn ions miiran ti o ni ipa wiwọn gbigba, bbl) , Iwọn OD ti o ni iwọn kii ṣe deede deede.Ni akoko kanna, nitori aini pato ti ohun elo ipinnu iye ifunmọ, DNA ti o ni ẹyọkan, DNA ti o ni ilọpo meji, RNA, dNTPs, ati diẹ ninu awọn ọlọjẹ gbogbo ni awọn oke gbigba ni 260nm igbi gigun, ati ifọkansi ti a pinnu nipasẹ A260 nikan kii ṣe dandan DNA gidi tabi RNA.Ifojusi, ati iduroṣinṣin ati ibajẹ rẹ ko le ṣe idajọ.

Nitorina bawo ni a ṣe le ṣe idajọ didara ti acid nucleic ti a sọ di mimọ?Ni afikun si lilo micro/ultramicro UV spectrophotometer fun wiwa, awọn ọna bii agarose gel electrophoresis tun nilo lati fi oju han mimọ ati iduroṣinṣin ti acid nucleic, ati lati tọka ifọkansi si iye kan.Ni ọna yii, ikore acid nucleic ati mimọ ti a gba lati awọn abajade wiwa ti awọn ọna pupọ jẹ igbẹkẹle.

Àfiwé chart àdánwò

DNA genomic ti awọn sẹẹli H1299 ni a fa jade ni lilo awọn ohun elo isediwon DNA ti ile-iṣẹ A, ati pe a rii ibajẹ aimọ pataki, ti o yọrisi awọn iye OD giga.

(Iye wiwọn OD ati elekitirogira ti o baamu)

Atọka igbelewọn

Njẹ “boṣewa goolu” wa fun ikore acid nucleic ati idanwo didara?

Gẹgẹ bi a ti mọ, ko si ọna ti o rọrun, iyara ati olowo poku.Boya o jẹ spectrophotometer, gel electrophoresis, tabi ibi-spectrometry, gbogbo wọn ṣe afihan ifọkansi ati mimọ ti nucleic acid ni ojutu lati awọn aaye oriṣiriṣi, ati pe wọn nilo lati ṣe idajọ nipasẹ sisọ si ara wọn.

Atọka igbelewọn ti o dara julọ jẹ nigbagbogboohun elo esiperimenta ti o tẹle.Ko ni ipa lori ṣiṣe ti transcription yiyipada ati imudara PCR.Gbigba awọn ọja imudara ti o ni igbẹkẹle ati awọn iye Ct, ati gbigba ọna pipe nipasẹ tito lẹsẹsẹ jẹ isediwon acid nucleic aṣeyọri.

Lati ṣe akopọ, iwo ti ero ipin-nikan yẹ ki o ni laya nipasẹ iwo ti “lilo awọn abajade esiperimenta ti o dara bi awọn aye-iyọkuro ti o dara”!

Awọn ohun elo isediwon DNA RNA Foregene ṣeduro lati ni mimọ DNA/RNA giga:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/