Awọn ọna PCR ati ibajẹ aerosol acid nucleic ninu awọn ile-iṣẹ idanwo nucleic acid dabi awọn ẹgbẹ meji ti owo kan.A le yan lati ni tabi rara, ṣugbọn a ko le yan boya a fẹ tabi lo.
1. Waworan ti DNA remover
Lati ṣaṣeyọri yiyọkuro aaye ti nucleic acid aerosol kontaminesonu, o jẹ dandan lati ṣe iboju jade awọn imukuro DNA ti o le yọ awọn acids nucleic kuro ni ipo omi.Nitoripe ko si ọpọlọpọ awọn imukuro DNA ti o ṣiṣẹ gaan.Fun ọna idanwo, jọwọ tọka si: yiyọ DNA ko le jẹ “igun ikọkọ” ti yàrá-yàrá!
Ninu idanwo yii, awọn ẹda 100 / μL (CT to 31) ti ASFV plasmid ati imukuro DNA ti a ṣe iwọn nipasẹ PCR oni-nọmba ni a dapọ ni awọn iwọn dogba, ati lẹhinna fesi ni iwọn otutu yara fun 10min, 20min ati 30min ni atele.Lẹhin isediwon acid nucleic, a ṣe imudara qPCR.Iṣakoso rere ti a dapọ pẹlu plasmid ati omi ni a ṣe afiwe.Niwọn igba ti idanwo naa ko ti pari ni akoko kanna, iyapa kan le wa laarin awọn abajade, ṣugbọn ko ni ipa lori ipari idanwo naa.Titi di isisiyi, Mo ti ṣe iṣiro awọn ọja imukuro DNA ti iṣowo 10.Nikan No.. 1, No.. 6 ati No. 8 awọn ọja le munadoko degrade plasmid DNA ni olomi ipinle.Awọn ọja miiran ni fere ko si ipa.
Tabili 1 Nucleic acid ipa yiyọ kuro ti DNA ti o wa ni iṣowo
2. Idanwo ipa yiyọ DNA ti awọn alakokoro ti a lo nigbagbogbo
1. Ṣiṣayẹwo awọn apanirun ti a lo nigbagbogbo
Oríṣiríṣi àkóràn tí a sábà máa ń lò nínú àwọn yàrá ẹ̀rọ: aldehydes, phenols, alcohols, iyọ ammonium quaternary, peroxides, àwọn ìpèsè chlorine, àti acids àti àwọn ìpìlẹ̀.Awọn ipa ipakokoro ti awọn apanirun wọnyi lori awọn microorganisms ti jẹri ni kikun nipasẹ awọn idanwo, ṣugbọn Ko si data esiperimenta ti o to lori ipa ibajẹ ti awọn acids nucleic.Awọn ile-iṣẹ idanwo Nucleic acid nilo alakokoro ti kii ṣe ni ipa ipakokoro to dara nikan lori awọn microorganisms, ṣugbọn tun le ba DNA jẹ.Awọn abajade idanwo fihan pe awọn igbaradi chlorine meji nikan ti 84 alakokoro ati trichloroisocyanuric acid ati 1 M hydrochloric acid pade awọn ibeere.Niwọn igba ti 1 M hydrochloric acid jẹ ibajẹ pupọ, o gba ọ niyanju pe ki a lo awọn igbaradi chlorine bi isọnu egbin ni awọn ile-iṣẹ idanwo acid nucleic.Sibẹsibẹ, awọn igbaradi chlorine jẹ ibajẹ si awọn irin ati pe a ko le lo fun ipakokoro ti awọn ohun elo ati ẹrọ.
Table 2 DNA yiyọ ipa ti o yatọ si orisi ti disinfectants
2. Awọn kere munadoko fojusi ti chlorine ipalemo
Awọn apanirun ti o da lori chlorine ni ipa ibajẹ DNA ti o lagbara, ṣugbọn nitori ibajẹ irin ati ibinu wọn, wọn le ṣee lo lati nu ilẹ-ilẹ, awọn countertops ti kii ṣe irin, awọn imọran fifẹ, awọn tubes centrifuge ati awọn ohun idanwo miiran.
Ni ibamu si awọn "Titun Coronary Pneumonia Itọnisọna Itọnisọna Imudaniloju Arun Arun": Awọn oludoti (ẹjẹ awọn alaisan, awọn aṣiri ati eebi) ti o wa chlorine 5g/L-10g/L chlorine-disinfectant ti o ni;awọn ilẹ ipakà, awọn odi, ati awọn oju ohun ti o wa ni lilo chlorine 1g/L apanirun chlorine ti o wa: awọn aṣọ, ibusun ati awọn aṣọ wiwọ miiran ni a kọkọ wọ sinu ajẹsara chlorine pẹlu 0.5g/L chlorine ti o wa fun ọgbọn išẹju 30, lẹhinna nu bi o ti ṣe deede.
Tabili 3 ipa yiyọ DNA ti awọn ifọkansi oriṣiriṣi ti alakokoro chlorine
Awọn abajade idanwo fihan pe: nigbati ifọkansi chlorine ti o munadoko ba tobi ju tabi dọgba si 1.2 g/L, apanirun ti o ni chlorine le dinku patapata 100 idaako/μL plasmid nigbati o ba lo fun iṣẹju marun.Nigbati o ba n ṣiṣẹ fun iṣẹju mẹwa 10, alakokoro 84 pẹlu ifọkansi chlorine ti o munadoko ti o tobi ju tabi dogba si 0.6 g/L le sọ di 100 idaako/μL ti plasmids patapata.
3. Idanwo yiyọ afẹfẹ ti o jẹ alaimọ nipasẹ aerosol acid nucleic
Bawo ni lati nu soke ni air ti a ti doti nipa nucleic acid aerosols?Pupọ julọ awọn ero ni lati ṣẹda agbegbe ti a ti doti ti aerosol ati lẹhinna sọ di mimọ, tabi lati nu awọn acids nucleic kuro lẹhin ibajẹ.Fun mi, idanwo ti ko le tun ṣe ati awọn abajade idanwo naa ko le ṣe itupalẹ ni iwọn jẹ asan, nitorinaa Mo ya diẹ ninu awọn ọna ti disinfectant air disinfection.Wo "GB27948-2020 Awọn ibeere Gbogbogbo fun Awọn apanirun Afẹfẹ" ati "Awọn pato Imọ-ẹrọ Disinfection"
1. Awọn ohun elo idanwo
1.1 DNA remover: Ni yi ṣàdánwò, meji lopo wa DNA removers 6 ati 8 ni Table 1 ti yan.
1.2 Igbeyewo plasmid: Ti o ba ṣe akiyesi pe iye CT ti idoti yàrá pupọ julọ yoo ga ju 30 lọ, ifọkansi ti ASFV gene plasmid ti a lo ni akoko yii jẹ nipa awọn ẹda 100 / μL, ati pe PCR CT pipo fluorescent jẹ nipa 31.07.Fi plasmid kun si swab owu agbo ati afẹfẹ gbẹ.
1.3 Ohun elo Idanwo: Ohun elo disinfection Bilingkehan KVBOX, eyiti o jẹ atilẹyin nipasẹ Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., ni iṣẹ ṣiṣe imukuro afẹfẹ ti o dara julọ pẹlu disinfectant hydrogen peroxide, ati pe o le ni imunadoko pa awọn spores ati awọn microorganisms miiran.
1.4 Aye idanwo: window gbigbe pipade ti o to awọn mita onigun 0.1.
2. Ọna idanwo
Iwọn ti ajẹsara ti a ṣeto lori ẹrọ disinfection jẹ 10ml, ati pe ifọkansi jẹ 100ml/m3, eyiti o ga julọ ju “GB27948-2020 Awọn ibeere Gbogbogbo fun Awọn Disinfectants Air”: nigba lilo disinfection aerosol spray, iye disinfectant yẹ ki o jẹ ≤10 milimita / m3
Lẹhin ti spraying, ti o ti edidi fun 2 wakati, ati ki o si awọn agbo ẹran pẹlu plasmid ti a eluted pẹlu TE, ati awọn flocked swab pẹlu plasmid lai fumigation ti ṣeto bi a Iṣakoso.Lo ọna PCR pipo fluorescence fun wiwa.
Table 4 Air nucleic acid awọn esi idanwo yiyọ
3. Awọn esi idanwo
Awọn iru meji ti yọkuro DNA ti o le mu awọn plasmids ni imunadoko ni ipo olomi ko ni ipa rara ninu idanwo yiyọ nuucleic acid afẹfẹ.Mo n reti lati wa ojutu kan ti o le ṣee lo lati yọ idoti aerosol ti nucleic acid kuro ninu afẹfẹ lati yanju patapata iṣoro ti idoti aerosol ti nucleic acid ni awọn ile-iṣẹ idanwo nucleic acid, ṣugbọn ko si iru ọja bẹ fun akoko naa.Mo gbagbọ pe ni ojo iwaju, awọn imukuro nucleic acid ti o ga julọ yoo wa ti o le ṣee lo fun yiyọkuro afẹfẹ nucleic acid.
4. Fun soke awọn iruju ati idojukọ lori idena
Laibikita bawo ni awọn ile-iṣẹ ṣe ṣogo nipa awọn ọja yiyọkuro acid nucleic wọn, Mo daba pe ọpọlọpọ awọn ọrẹ ti o ṣiṣẹ ni idanwo nucleic acid fun ni ẹẹkan ati fun gbogbo awọn iruju ati da otitọ: o nira pupọ lati yọ afẹfẹ ti a sọ di aimọ nipasẹ awọn aerosols acid nucleic, tabi mu iwọn idena to lagbara ati iṣẹ ibojuwo ojoojumọ!
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹsan-10-2021
