• facebook
  • ti sopọ mọ
  • youtube

Awọn ọlọjẹ, ti a tun pe ni immunoglobulins (Ig), jẹ awọn glycoprotein ti o sopọ mọ awọn antigens ni pato.
 
Igbaradi antibody ti aṣa jẹ iṣelọpọ nipasẹ jijẹ ajesara awọn ẹranko ati gbigba antiserum.Nitorinaa, antiserum nigbagbogbo ni awọn apo-ara lodi si awọn antigens miiran ti ko ni ibatan ati awọn paati amuaradagba miiran ninu omi ara.Awọn ohun alumọni antijeni gbogbogbo julọ ni ọpọlọpọ awọn epitopes oriṣiriṣi lọpọlọpọ, nitorinaa awọn apo-ara ti aṣa tun jẹ adalu awọn apo-ara lodi si ọpọlọpọ awọn epitopes oriṣiriṣi.Paapaa awọn aporo inu omi ara ti ara ẹni ti o tọka si epitope kanna tun ni awọn aporo inu orisirisi ti a ṣe nipasẹ oriṣiriṣi awọn ere ibeji sẹẹli B.Nitorinaa, awọn aporo inu omi ara ti aṣa ni a tun pe ni awọn apo-ara polyclonal, tabi awọn apo-ara polyclonal fun kukuru.
 
Agbogun ara Monoclonal (egbogun ti monoclonal) jẹ agbogidi aṣọ-ara ti o ga julọ ti a ṣejade nipasẹ ẹda oniye B cell kan ati pe o ni itọsọna nikan si epitope kan pato.Nigbagbogbo a pese sile nipasẹ imọ-ẹrọ hybridoma — imọ-ẹrọ antibody hybridoma da lori imọ-ẹrọ idapọ sẹẹli, apapọ awọn sẹẹli B pẹlu agbara lati ṣe aṣiri awọn ajẹsara pato ati awọn sẹẹli myeloma pẹlu agbara idagbasoke ailopin sinu hybridomas B-cell.sẹẹli hybridoma yii ni awọn abuda ti sẹẹli obi kan.O le pọ sii lainidi ati aiku ni fitiro bi awọn sẹẹli myeloma, ati pe o le ṣepọ ati ṣe aṣiri awọn ajẹsara kan pato bi awọn lymphocytes splenic.Nipasẹ cloning, laini monoclonal kan ti o gba lati inu sẹẹli hybridoma kan ṣoṣo, iyẹn ni, laini sẹẹli hybridoma, ni a le gba.Awọn apo-ara ti o ṣe jade jẹ awọn apo-ara isokan ti o ga julọ lodi si ipinnu antigenic kanna, iyẹn ni, awọn ajẹsara monoclonal.
 
Awọn aporo-ara wa bi ọkan tabi diẹ ẹ sii awọn monomers ti o ni apẹrẹ Y (ie, awọn apo-ara monoclonal tabi awọn aporo-ara polyclonal).monomer ti o ni apẹrẹ Y kọọkan ni awọn ẹwọn polypeptide 4, pẹlu awọn ẹwọn eru kanna meji ati awọn ẹwọn ina kanna meji.Ẹwọn ina ati ẹwọn eru jẹ orukọ ni ibamu si iwuwo molikula wọn.Oke ti ọna apẹrẹ Y jẹ agbegbe oniyipada, eyiti o jẹ aaye abuda antigen.(Yijade lati inu imọran Antibody Detai Bio-Monoclonal)
 
Antibody be
1Ẹwọn eru
Oriṣiriṣi awọn ẹwọn eru mammalian Ig marun wa, ti a darukọ pẹlu awọn lẹta Giriki α, δ, ε, γ, ati μ.Awọn egboogi ti o baamu ni a npe ni IgA, IgD, IgE, IgG, ati IgM.Awọn ẹwọn eru oriṣiriṣi yatọ ni iwọn ati akopọ.α ati γ ni isunmọ 450 amino acids, nigba ti μ ati ε ni awọn amino acids 550 to sunmọ.
Ẹwọn eru kọọkan ni awọn agbegbe meji: agbegbe igbagbogbo ati agbegbe oniyipada.Gbogbo awọn apo-ara ti iru kanna ni agbegbe igbagbogbo kanna, ṣugbọn awọn iyatọ wa laarin awọn apo-ara ti awọn oriṣi oriṣiriṣi.Awọn ẹkun igbagbogbo ti awọn ẹwọn eru γ, α, ati δ jẹ ti awọn ibugbe Ig mẹta ni tandem, pẹlu agbegbe mitari lati mu irọrun rẹ pọ si;awọn ẹkun igbagbogbo ti awọn ẹwọn ti o wuwo μ ati ε jẹ ti awọn ibugbe 4 Ig.Ekun oniyipada ti ẹwọn eru ti agboguntaisan ti o ṣe nipasẹ oriṣiriṣi awọn sẹẹli B yatọ, ṣugbọn agbegbe oniyipada ti aporo ti a ṣe nipasẹ sẹẹli B kanna tabi ẹda oniye jẹ kanna, ati agbegbe oniyipada ti pq eru kọọkan jẹ nipa 110 amino acids ni gigun., Ati pe o ṣẹda aaye Ig kan.
 
Imọlẹ pq
Awọn oriṣi meji nikan ti awọn ẹwọn ina ni awọn ẹran-ọsin: iru lambda ati iru kappa.Ẹwọn ina kọọkan ni awọn ibugbe asopọ meji: agbegbe igbagbogbo ati agbegbe oniyipada.Gigun ti pq ina jẹ nipa 211 ~ 217 amino acids.Awọn ẹwọn ina meji ti o wa ninu aporo ara kọọkan jẹ kanna nigbagbogbo.Fun awọn ẹran-ọsin, pq ina ninu aporo ara kọọkan ni iru kan nikan: kappa tabi lambda.Ni diẹ ninu awọn vertebrates kekere, gẹgẹbi awọn ẹja cartilaginous (awọn ẹja kekere) ati awọn ẹja egungun, awọn iru miiran ti awọn ẹwọn ina gẹgẹbi iota (iota) iru ni a tun rii.
 
Fab ati Fc apa
Apa Fc le ni idapo taara pẹlu awọn ensaemusi tabi awọn awọ Fuluorisenti lati ṣe aami awọn ọlọjẹ.O jẹ apakan nibiti antibody rivets lori awo lakoko ilana ELISA, ati pe o tun jẹ apakan nibiti a ti mọ antibody keji ti a dè ni imunoprecipitation, immunoblotting ati immunohistochemistry.Awọn ajẹsara le jẹ hydrolyzed si awọn apakan F (ab) meji ati apakan Fc kan nipasẹ awọn enzymu proteolytic gẹgẹbi papain, tabi wọn le fọ lati agbegbe hinge nipasẹ pepsin ati hydrolyzed sinu apakan F (ab) 2 kan ati apakan Fc kan.Awọn ajẹkù antibody IgG ma wulo pupọ nigba miiran.Nitori aini ti apakan Fc, apakan F (ab) kii yoo ṣaju pẹlu antijeni, tabi kii yoo gba nipasẹ awọn sẹẹli ajẹsara ninu awọn ẹkọ vivo.Nitori awọn ajẹkù molikula kekere ati aini iṣẹ ọna asopọ agbelebu (nitori aini ti apakan Fc), apakan Fab ni a maa n lo fun aami redio ni awọn ẹkọ iṣẹ, ati pe apakan Fc ni a lo ni akọkọ bi aṣoju idinamọ ni idoti histochemical.
 
Ayipada ati ibakan agbegbe
Ekun oniyipada (agbegbe V) wa ni 1/5 tabi 1/4 (ti o ni awọn iyokù amino acid 118) ti ẹwọn H nitosi N-terminus ati 1/2 (ti o ni awọn iṣẹku 108-111 amino acid) nitosi N-terminus ti pq L.Agbegbe V kọọkan ni oruka peptide kan ti a ṣẹda nipasẹ awọn ifunmọ disulfide intra-pq, ati pe oruka peptide kọọkan ni isunmọ 67 si 75 awọn iṣẹku amino acid.Iṣakojọpọ ati iṣeto ti awọn amino acids ni agbegbe V pinnu iyasọtọ abuda antijeni ti agbogidi.Nitori awọn oriṣi iyipada nigbagbogbo ati ọna ti amino acids ni agbegbe V, ọpọlọpọ awọn iru awọn apo-ara pẹlu oriṣiriṣi awọn pato antijeni abuda le ṣe agbekalẹ.Awọn agbegbe V ti L pq ati H pq ni a npe ni VL ati VH, lẹsẹsẹ.Ni VL ati VH, amino acid tiwqn ati ọkọọkan ti diẹ ninu awọn agbegbe agbegbe ni kan ti o ga ìyí ti iyatọ.Awọn agbegbe wọnyi ni a pe ni awọn agbegbe hypervariable (HVR).Apapọ amino acid ati iṣeto ti awọn ẹya ti kii ṣe HVR ni agbegbe V jẹ Konsafetifu jo, eyiti a pe ni agbegbe ilana.Awọn agbegbe hypervariable mẹta wa ni VL, nigbagbogbo wa ni awọn iṣẹku amino acid 24 si 34 ati 89 si 97 ni atele.Awọn HVR mẹta ti VL ati VH ni a pe ni HVR1, HVR2 ati HVR3, lẹsẹsẹ.Iwadi ati igbekale ti X-ray crystal diffraction safihan pe agbegbe hypervariable nitootọ ni ibi ti antigen antigen ti sopọ, nitorina ni a ṣe pe ni agbegbe-ipinnu ibamu (CDR).HVR1, HVR2 ati HVR3 ti VL ati VH ni a le pe ni CDR1, CDR2 ati CDR3 lẹsẹsẹ.Ni gbogbogbo, CDR3 ni iwọn giga ti hypervariability.Agbegbe hypervariable tun jẹ ipo akọkọ nibiti awọn ipinnu idiotypic ti awọn ohun elo Ig wa.Ni ọpọlọpọ igba, ẹwọn H ṣe ipa pataki diẹ sii ni sisopọ si antijeni.
2Agbegbe igbagbogbo (agbegbe C)wa ni 3/4 tabi 4/5 (isunmọ lati amino acid 119 si ebute C) ti ẹwọn H nitosi C terminus ati 1/2 (ni nipa awọn iṣẹku amino acid 105 ninu) nitosi C terminus ti pq L.Ẹkun iṣẹ kọọkan ti pq H ni nipa awọn iṣẹku amino acid 110, ati pe o ni oruka peptide kan ti o ni awọn iṣẹku amino acid 50-60 ti o ni asopọ nipasẹ awọn ifunmọ disulfide.Akopọ amino acid ati eto agbegbe yii jẹ igbagbogbo igbagbogbo ni ẹwọn Ig isotype L kanna ati iru H pq kanna.Bakanna, o le sopọ ni pataki nikan si antijeni ti o baamu, ṣugbọn eto ti agbegbe C rẹ jẹ kanna, iyẹn ni, o ni antigenicity kanna.Ẹṣin egboogi-eda eniyan IgG antibody secondary (tabi egboogi-egboogi) le ni idapo pelu awọn meji A apapo ti awọn apo-ara (IgG) lodi si oriṣiriṣi exotoxins waye.Eyi jẹ ipilẹ pataki fun igbaradi awọn aporo-ara Atẹle ati lilo fluorescein, isotopes, awọn ensaemusi ati awọn aporo ti o ni aami miiran.
 
 
Awọn ọja ti o jọmọ:
Cell Direct RT-qPCR kit

 

 


Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹsan-30-2021