• facebook
  • ti sopọ mọ
  • youtube
asia_oju-iwe

Ohun elo sẹẹli Taara RT qPCR-SYBR GREEN Mo Dari Ẹyin sẹẹli Lysis Ṣetan Igbesẹ kan-QRT-PCR Awọn ohun elo

Apejuwe Kit:

Cat.No.DRT-01011/01012

Fun sẹẹli taara RT-qPCR ni lilo awọn sẹẹli 10-1,000,000,

ati ṣiṣe RT-qPCR taara lati awọn sẹẹli laisi isọdi RNA ṣaaju.

Awọn sẹẹli ti wa ni lysed taara lati tu RNA silẹ fun RT-qPCR;eto ifarada giga jẹ ki o jẹ ko wulo lati sọ di mimọ RNA ati lo awọn lysates sẹẹli taara bi awọn awoṣe RNA fun awọn aati RT.Yara ati irọrun;ga ifamọ, lagbara pato, ati ti o dara iduroṣinṣin.

◮ Rọrun ati imunadoko: pẹlu Cell Direct RT ọna ẹrọ, RNA awọn ayẹwo le wa ni gba ni o kan 7 iṣẹju.

Ibeere ayẹwo jẹ kekere, bi kekere bi awọn sẹẹli 10 le ṣe idanwo.

◮Iwọn igbasilẹ giga: o le ṣe awari RNA ni kiakia ninu awọn sẹẹli ti a gbin ni 384, 96, 24, 12, 6-daradara farahan.

Eraser DNA le yarayara yọ awọn genomes ti a tu silẹ, dinku ipa pupọ lori awọn abajade esiperimenta ti o tẹle.

Iṣapeye RT ati eto qPCR jẹ ki ifasilẹ ipadasẹhin meji-igbesẹ RT-PCR daradara siwaju sii ati PCR ni pato diẹ sii, ati diẹ sii sooro si awọn inhibitors ifaseyin RT-qPCR.


Alaye ọja

ọja Tags

FAQ

Ṣe igbasilẹ awọn orisun

Awọn apejuwe

Ohun elo yii nlo eto ifipamọ lysis alailẹgbẹ ti o le ṣe idasilẹ RNA ni kiakia lati awọn ayẹwo sẹẹli ti o gbin fun awọn aati RT-qPCR, nitorinaa imukuro akoko-n gba ati ilana isọdọmọ RNA alaapọn.Awoṣe RNA le gba ni iṣẹju 7 nikan.Awọn 5×Dapọ RT taara ati 2×Awọn reagents taara qPCR Mix-SYBR ti a pese nipasẹ ohun elo le yarayara ati imunadoko gba awọn abajade PCR pipo akoko gidi.

5×Dapọ RT taara ati 2×Taara qPCR Mix-SYBR ni ifarada inhibitor ti o lagbara, ati lysate ti awọn ayẹwo le ṣee lo bi awoṣe fun RT-qPCR taara.Ohun elo yii ni alailẹgbẹ RNA giga-ibarapọ Foregene yiyipada transcriptase, ati Hot D-Taq DNA polymerase, dNTPs, MgCl2, saarin lenu, PCR optimizer ati amuduro.

Awọn pato

200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Awọn paati ohun elo

Apa I

Ifipamọ CL

Foregene Protease Plus II

Buffer ST

Apa II

DNA eraser

5× Taara RT Mix

2× Taara qPCR Mix-SYBR

50× ROX Itọkasi Dye

RNase-Ọfẹ ddH2O

Awọn ilana

Awọn ẹya & awọn anfani

Rọrun ati imunadoko: pẹlu imọ-ẹrọ Cell Direct RT, awọn ayẹwo RNA le gba ni iṣẹju 7 nikan.

■ Ibeere ayẹwo jẹ kekere, bi kekere bi awọn sẹẹli 10 le ṣe idanwo.

■ Imujade giga: o le ṣe awari RNA ni kiakia ninu awọn sẹẹli ti a gbin ni 384, 96, 24, 12, 6-well plates.

■ Eraser DNA le yara yọ awọn genomes ti a ti tu silẹ, dinku pupọ ni ipa lori awọn abajade idanwo ti o tẹle.

■ Iṣapeye RT ati eto qPCR jẹ ki ifasilẹ ipadasẹhin-igbesẹ meji RT-PCR ṣiṣẹ daradara ati PCR ni pato diẹ sii, ati diẹ sii sooro si awọn inhibitors ifasẹyin RT-qPCR.

Ohun elo Kit

Dopin ti ohun elo: gbin ẹyin.

- RNA ti a tu silẹ nipasẹ lysis ayẹwo: nikan wulo si awoṣe RT-qPCR ti ohun elo yii.

- Ohun elo naa le ṣee lo fun awọn idi wọnyi: itupalẹ ikosile jiini, ijẹrisi ti ipa ipalọlọ jiini-ilaja siRNA, ibojuwo oogun, ati bẹbẹ lọ.

Aworan atọka

Cell Direct RT qPCR aworan atọka

Ibi ipamọ ati igbesi aye Selifu

Apakan I ti kit yii yẹ ki o wa ni ipamọ ni 4 ℃;Apa II yẹ ki o wa ni ipamọ ni -20 ℃.

 Foregene Protease Plus II yẹ ki o wa ni ipamọ ni 4℃, ma ṣe di ni -20 ℃.

 Reagent 2×Taara qPCR Mix-SYBR yẹ ki o wa ni ipamọ ni -20ninu okunkun;ti o ba lo nigbagbogbo, o tun le wa ni ipamọ ni 4℃ fun ibi ipamọ igba kukuru (lo laarin awọn ọjọ 10).


  • Ti tẹlẹ:
  • Itele:

  • Real Time PCR alakoko oniru agbekale

    Siwaju Alakoko ati Yiyipada Alakoko

    Fun Real Time PCR, apẹrẹ alakoko jẹ pataki pupọ.Awọn alakoko jẹ ibatan si pato ati ṣiṣe ti imudara PCR, ati pe o le ṣe apẹrẹ pẹlu itọkasi awọn ipilẹ wọnyi:

    Alakoko ipari: 18-30bp.

    GC akoonu: 40-60%.

    Iye Tm: sọfitiwia apẹrẹ alakoko, gẹgẹbi alakoko 5, le fun iye Tm ti alakoko.Awọn iye Tm ti oke ati isalẹ awọn alakoko yẹ ki o wa ni isunmọ bi o ti ṣee ṣe.Ilana iṣiro Tm tun le ṣee lo: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Nigbati o ba n ṣiṣẹ PCR, iwọn otutu ti o wa ni isalẹ iye Tm alakoko ti 5 °C ni a yan ni gbogbogbo bi iwọn otutu annealing (ilosoke ti o baamu ni iwọn otutu annealing le mu iyasọtọ ti iṣe PCR pọ si).

    Awọn alakoko ati awọn ọja PCR:

    Apẹrẹ alakoko PCR ipari ọja ipari jẹ pelu 100-150bp.

    Awọn alakoko apẹrẹ ni agbegbe igbekalẹ Atẹle ti awoṣe yẹ ki o yago fun bi o ti ṣee ṣe.

    Yago fun dida 2 tabi diẹ sii awọn ipilẹ ibaramu laarin awọn opin 3′ ti oke ati awọn alakoko isalẹ.

    Alakoko 3' ipilẹ ebute ko le wa pẹlu 3 afikun itẹlera G tabi C.

    Awọn alakoko funrara wọn ko le ni awọn ẹya ibaramu, bibẹẹkọ eto irun ori kan yoo ṣẹda, ti o kan imudara PCR.

    ATCG yẹ ki o pin kaakiri bi o ti ṣee ṣe ni ọna alakoko, ati ipilẹ ebute 3′ yẹ ki o yago fun bi T.

    Àfikún 1: Cell Direct RT-qPCR Apo afikun paati

    1.Cell Lysis Solusan


    Cell Lysis Solusan

    Awọn paati ohun elo

    (24-daraga lysis eto / daradara)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    ApakanI

    Ifipamọ CL

    20 milimita

    100 milimita

    Foregene Protease Plus II

    400 milimita

    1 milimita × 2

    Buffer ST

    1 milimita × 2

    10 milimita

    ApakanII

    DNA eraser

    400 milimita

    1 milimita × 2

    2.RT Mix


    Apapo RT

    Awọn paati ohun elo

    (20 μl eto esi)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× Taara RT Mix

    800 milimita

    RNase-Ọfẹ ddH2O

    1.7 milimita × 2

     

    3.qPCR Mix


    qPCR Apapo

    Awọn paati ohun elo

    (20 μl eto esi)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× Taara qPCR Mix-SYBR

    1 milimita × 2

    1.7 milimita × 6

    50× ROX Itọkasi Dye

    40 μl

    200 milimita

    RNase-Ọfẹ ddH2O

    1.7 milimita

    10 milimita

    Awọn itọnisọna itọnisọna:

    QuickEasyTM Cell Taara RT-qPCR Kit-SYBR Green I

    Kọ ifiranṣẹ rẹ nibi ki o si fi si wa