FAQ's funAnimal Total RNA Ipinya kit
Itupalẹ atẹle ti awọn iṣoro ti o le ba pade ninueranko àsopọ / cell RNA isediwon will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.
A ko yọ RNA jade tabi awọn ikore RNA kere
Nigbagbogbo ọpọlọpọ awọn ifosiwewe ti o ni ipa ṣiṣe imularada, gẹgẹbi: akoonu RNA ayẹwo ti ara, ọna ṣiṣe, iwọn didun elution, ati bẹbẹ lọ.
1. Ice wẹ tabi cryogenic (4 ° C) centrifugation ti a ṣe nigba isẹ.
Iṣeduro: Ṣiṣẹ ni iwọn otutu yara (15-25 ° C) jakejado gbogbo ilana, ma ṣe iwẹ yinyin ati centrifuge ni awọn iwọn otutu kekere.
2. Itọju apẹẹrẹ ti ko tọ tabi akoko ipamọ ayẹwo ti o pọju.
Iṣeduro: Tọju awọn ayẹwo ni -80 °C tabi di ninu omi nitrogen ati yago fun lilo didi-diẹ leralera;gbiyanju lati lo àsopọ titun tabi awọn sẹẹli ti o gbin fun isediwon RNA.
3. Ayẹwo lysis ti ko to.
Iṣeduro: Nigbati o ba n ṣe isokan, rii daju pe àsopọ ti wa ni isokan ti o to ati pe awọn sẹẹli tisọ ti pin ni kikun lati ṣe alaye itusilẹ ti RNA.
4. A ko fi eluent kun daradara.
Iṣeduro: Jẹrisi pe RNase-Ọfẹ ddH2O ti wa ni afikun dropwise si arin ti awọn awo iwe iwe ìwẹnumọ.
5. Iwọn ti o pe ti ethanol pipe ko ni afikun si Buffer RL2 tabi Buffer RW2.
Iṣeduro: Tẹle awọn itọnisọna, ṣafikun iwọn didun to pe ti ethanol pipe si Buffer RL2 ati Buffer RW2 ki o dapọ daradara ṣaaju lilo ohun elo naa.
6. Tissue sample doseji ko yẹ.
Iṣeduro: Lo 10-20 mg ti àsopọ tabi (1-5) × 106awọn sẹẹli fun 500 μl saarin RL1, bi lilo àsopọ ti o pọ julọ le ja si idinku RNA ti o dinku.
7. Iwọn didun elution ti ko tọ tabi elution ti ko pari.
Iṣeduro: Iwọn elution ti iwe-mimọ jẹ 50-200 μl;ti ipa elution ko ba ni itẹlọrun, o gba ọ niyanju lati fa akoko gbigbe iwọn otutu yara lẹhin fifi RNase-ọfẹ ddH ti o ti ṣaju tẹlẹ.2O, fun apẹẹrẹ fun awọn iṣẹju 5-10.
8.The ìwẹnumọ iwe ni o ni ethanol aloku lẹhin Buffer RW2 w.
Iṣeduro: Ti iyọkuro ethanol ba wa lẹhin fifọ Buffer RW2, centrifugation tube ofo fun iṣẹju 1, akoko fun iṣẹ centrifugation tube ofo le pọ si iṣẹju 2, tabi iwe iwẹnu le gbe ni iwọn otutu yara fun iṣẹju 5 lati yọ ethanol ti o ku kuro ni deede.
RNA ti a sọ di mimọ ti bajẹ
Didara ti RNA ti a sọ di mimọ jẹ ibatan si awọn nkan bii titọju apẹẹrẹ, ibajẹ RNase, ati ifọwọyi, ati bẹbẹ lọ.
1. Awọn ayẹwo ti ara ko ni pa ni akoko.
Iṣeduro: Ti a ko ba lo awọn ayẹwo ara tabi awọn sẹẹli ni akoko ti o yẹ lẹhin gbigba, lẹsẹkẹsẹ cryopreserve ni -80 °C tabi nitrogen olomi.Lati yọ RNA jade, lo àsopọ tuntun tabi ayẹwo sẹẹli nigbakugba ti o ṣee ṣe.
2. Tun didi-thawing ti awọn ayẹwo àsopọ.
Iṣeduro: Nigbati o ba tọju awọn ayẹwo ti ara, o dara julọ lati ge wọn si awọn ege kekere fun itoju, ki o yọ ọkan ninu awọn ege naa kuro nigba lilo wọn lati yago fun didi didi ti ayẹwo ati ibajẹ ti RNA.
3. RNase ti ṣafihan tabi ko wọ awọn ibọwọ isọnu, awọn iboju iparada, ati bẹbẹ lọ lakoko iṣẹ naa.
Iṣeduro: Awọn adanwo isediwon RNA ni a ṣe dara julọ ni awọn yara ifọwọyi RNA lọtọ ati pe tabili ti sọ di mimọ ṣaaju idanwo naa.
Wọ awọn ibọwọ isọnu ati awọn iboju iparada lakoko idanwo lati dinku ibajẹ RNA ti o fa nipasẹ ifihan RNase.
4. Reagents ti wa ni ti doti pẹlu RNase nigba lilo.
Iṣeduro: Rọpo pẹlu Apo Ipinya Apapọ RNA Ẹranko tuntun fun awọn adanwo ti o jọmọ.
5. Awọn tubes centrifuge, awọn imọran, ati bẹbẹ lọ ti a lo ninu ifọwọyi RNA ti doti pẹlu RNase.
Iṣeduro: Jẹrisi pe awọn tubes centrifuge, awọn imọran, pipettes, ati bẹbẹ lọ ti a lo ninu isediwon RNA jẹ gbogbo RNase-ọfẹ.
RNA ti a sọ di mimọ yoo kan awọn adanwo ibosile
RNA ti sọ di mimọ nipasẹ ọwọn iwẹnumọ, ti awọn ions iyọ, akoonu amuaradagba ti tobi ju yoo ni ipa lori idanwo isalẹ, gẹgẹbi: transcription yiyipada, Northern Blot et al.
1. Awọn elutioned RNA ni iyọ ion iṣẹku.
Iṣeduro: Jẹrisi pe iwọn didun ti ethanol ti o pe ti ni afikun si Buffer RW2 ati ṣe awọn fifọ iwe-mimọ 2 ni iyara centrifugal ti a tọka fun iṣẹ;ti iyọkuro iyọ iyọ eyikeyi ba wa, lọ kuro ni iwe iwẹnumọ si Buffer RW2 fun iṣẹju 5 ni iwọn otutu yara ki o ṣe centrifugation lati mu yiyọkuro idoti iyọ pọ si.
2. Aloku Ethanol ni RNA elutioned.
Iṣeduro: Jẹrisi pe lẹhin fifọ RW2 fifọ, ṣe iṣiṣẹ centrifugation tube ofo ni iyara centrifugation ti a fihan fun iṣẹ, mu akoko iṣẹ centrifugation tube ti o ṣofo pọ si iṣẹju 2 ti aloku ethanol tun wa, tabi fi silẹ ni iwọn otutu yara fun iṣẹju 5 lẹhin centrifugation tube ofo lati mu imukuro ethanolize pọ si.
Iyasọtọ ti awọn iru apẹẹrẹ ti nulceic acid
Awọn ohun elo Ipinya RNA ti Foregene le gba ipinya / isediwon RNA lapapọ lati awọn eso ayẹwo atẹle wọnyi: ẹran ara ẹranko, ọgbin, awọn sẹẹli, gbogun ti, ẹjẹ, ati bẹbẹ lọ.
Bawo ni MO ṣe tọju ohun elo naa
Ibi ipamọ otutu yara fun awọn oṣu 24.
Akoko ifiweranṣẹ: Mar-01-2022
