Ipin kekere ti A260/A230 jẹ igbagbogbo nipasẹ awọn aimọ pẹlu iwọn gigun gbigba ti o pọju ni 230nm.Jẹ ki a wo kini awọn idoti wọnyi pẹlu:

• Awọn idoti ti o wọpọ	Gbigbọn gbigba gbigba	Ipa ipin
  Amuaradagba	~ 230nm ati 280nm	Idinku nigbakanna A260/A 280ati A260/A 280awọn ipin
  iyọ Guanidine	220-240 nm	Din A260/A 280ipin
  Phenol	270nm	-
  Trizol	~ 230nm ati 270nm	Din A260/A 280ipin
  EDTA	230nm	Din A260/A 280ipin
  Ethanol	230-240 nm	Din A260/A 280ipin

 
 
 
Gbigbọn gbigba ati iye itansan ti awọn idoti ti o wọpọ

Protein idoti
Amuaradagba idoti le jẹ bi idoti ti o wọpọ julọ ninu ilana isediwon acid nucleic.Amuaradagba wa laarin ipele olomi oke ati isalẹOrganicalakoso.Idoti yoo dinku ipin ti A260/A280 ati A260/A230 ni akoko kanna, ati ipin ti A260/A230 yoo yipada ni gbangba diẹ sii ju ipin A260/A280 lọ.
Nigba ti o tẹleyiyipada transcriptionor qPCR aati, awọn iṣẹku amuaradagba le ṣe idiwọ tabi dabaru pẹlu iṣẹ enzymu.Ọna ti o dara julọ lati yago fun idoti amuaradagba ni lati ranti ilana ti “dipo kere ju diẹ sii, iye kekere kan ni ọpọlọpọ igba” nigbati o ba n ṣafẹri supernatant naa.

2. Guanidinium idoti
hydrochloride (GuHCl) ati guanidine thiocyanate (GTC) ni ipa ti awọn ọlọjẹ denaturing, eyiti o le pa awọn membran sẹẹli run ni kiakia lakoko ilana isediwon acid nucleic, nfa denaturation protein ati ojoriro.Iwọn gigun gbigba ti GuHCl ati GTC wa laarin 220-240 nm, ati awọniyọ guanidinium ti o ku yoo dinku ipin A260/A230.Botilẹjẹpe iyọ guanidinium ti o ku yoo dinku ipin,ikolu lori awọn adanwo ibosile jẹ kosi aifiyesi.

3. Trizol idoti
Ẹya akọkọ ti Trizol jẹ phenol.Iṣẹ akọkọ ti phenol ni lati lyse awọn sẹẹli ati tu awọn ọlọjẹ ati awọn nkan acid nucleic ninu awọn sẹẹli.Botilẹjẹpe phenol le ni imunadoko awọn ọlọjẹ denature, ko le ṣe idiwọ iṣẹ ṣiṣe RNase patapata.Nitorina, 8 -hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-mercaptoethanol, bbl ti wa ni afikun si TRIzol lati dẹkun endogenous ati exogenous RNase.
Nigbati o ba n yọkuro RNA cellular, Trizol le ni kiakia lyse awọn sẹẹli ki o dẹkun iparun ti a tu silẹ lati inu awọn sẹẹli, ati pe Trizol iyokù yoo dinku ipin ti A260/A230 ni pataki.
Ọna ṣiṣe: Nigbati centrifuging, o gbọdọ ṣe akiyesi pe phenol ni Trizol jẹ irọrun tiotuka ni ipele omi labẹ ipo 4 ° ati iwọn otutu yara.

4. Iyoku Ethanol
A lo Ethanol ni ilana ikẹhin lati ṣaju DNA lakoko titu awọn ions iyọ ti o le so mọ DNA.Awọn gbigba wefulenti ti awọn gagbigba tente oke tiethanol tun wa ni 230-240 nm, eyitiyoo tun din ipin ti A260/A230.
Awọn ọna ti a yago fun ethanol aloku le ti wa ni tun lemeji nigba ti ik elution, fifun ni awọneefin Hoodfun iṣẹju meji lati gba ethanol laaye lati yọ ni kikun ṣaaju ki o to ṣafikun ifipamọ fun elution.
Bibẹẹkọ, o yẹ ki o mọ pe ipin jẹ atọka igbelewọn nikan ti didara RNA.Ti awọn iṣẹ ṣiṣe ti a mẹnuba loke jẹ ilana ti o muna, iyapa laarin ipin ati iwọn boṣewa kii yoo ni ipa nla lori awọn adanwo isalẹ.
Awọn ọja ti o jọmọ:
Animal Total RNA Ipinya kit
Ohun ọgbin Total RNA Ipinya ohun elo
Cell Total RNA Ipinya kit
Ohun ọgbin Total RNA Ipinya ohun elo Plus